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睢县中医院检验科 微生物实验室 操作指导书 （第一版） 编制： 冯海珍 审核： 邱艳杰 韩露 批准： 周凤 生效日期：二零一六年十二月一日 睢县中医院医院检验科微生物室 细菌室人员岗位职责……………………………………………………..2 细菌室工作人员管理规定及报告时间… ……………………………….4 标本采集及保存要求 ……………………………………………………7 显微镜检查法操作规程 …………………………………………………9 细菌室标本操作流程……………………………………………………11 细菌室形态检查操作规程………………………………………………13 细菌生化反应鉴定及其他实验操作规程………………………………18 细菌的接种与培养方法操作规程………………………………………23 支原体培养、鉴定、计数及药敏操作规程……………………………25 血液感染病原体检验操作规程…………………………………………27 中枢神经系统感染病原体检验操作规程………………………………29 创伤和外科感染病原体检验操作规程…………………………………31 下呼吸道感染病原体检验操作规程……………………………………32 消化道感染病原体检验操作规程………………………………………34 尿路感染病原体检验操作规程…………………………………………35 脓汁及病灶分泌物细菌检验操作规程…………………………………36 生殖系统标本的处理……………………………………………………38 超广谱β—内酰胺酶（ESBLs）检测 …………………………………40 消毒灭菌效果监测……………………………………………………….41 环境卫生学监测………………………………………………………….42 采样及检查原则………………… .………….…………………………..43 各部位的消毒…………………………………………………………….48 文件 编码 JYK-SOP—001 文件 名称 细菌室人员岗位职责 执行时间 （第一版） 2016.12.01 细菌室人员岗位职责 1、上班后先搞好室内卫生、核查各个培养箱、冰箱的工作温度是否在设定的范围内，并做好记录。 2、检查各种培养基及试剂的库存量，做好需配制培养基或购买试剂的交班工作。 3、接收样本：核对各样本号与申请单联号是否一致，如不一致马上与病房联系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。核查各送检样本是否符合要求。 ① 痰液样本：先看外观、再直接涂片镜检，低倍镜下见白细胞25个，10上皮细胞25个／每个视野，为合格痰液。 ② 无菌体液样本：检查各种无菌体液样本的盛放器皿是否符合要求。 ③ 容易干燥的样本：对一些容易干燥的样本如大便、咽拭子、脓液拭子、泌尿生殖道拭子等是否已经干燥。 对不符合要求的样本必需与临床联系，以便作出相应处理，方法如联号不符的样本。做 好记录。对符合的样本进行原始单的登记。 4、样本编号：对符合的样本作出编号，普通细菌培养：痰液、咽拭子、血液增菌培养、尿液、胸、腹水、脑脊液、胆汁、脓液、泌尿生殖道拭子、大便致病菌培养。在各种培养基上及申请单上编号的同时均需明确标明接种日期。各种涂片样本编号：抗酸染色、G—双球 涂片。 5、样本接种： ① 血液、骨髓、腹水、关节液等：增菌培养瓶 ② 痰液、咽拭子、脑脊液分别接种：血平板、巧克力平板、麦康凯平板； ⑨ 尿液接种：血平板、巧克力平板、Mac： ④ 各种无菌体液、脓液、泌尿生殖道分泌物接种：血平板、巧克力平板； ⑤ 大便致病菌：接种SS平板、麦康凯平板； ⑥ 分泌物的淋球菌培养接种：淋球菌专用平板； ⑦ 支原体培养+药敏，按说明书接种支原体专用培养基； 对以上接种样本的当前编号应记录于登记本上。此外对痰、脓液、脑脊液等在接种的同时应对其沉渣进行革兰染色，如有细菌和／或何种细菌为主立刻通知临床，并做好记录。 6、涂片染色：抗酸染色严格按照操作规程，漂浮法涂片痰液样本，胸腹水、尿液、脑脊液等约10m1于试管中低速1000转／分离心2分钟后取上清于另一管中，5000转／分高速离心10分钟，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按说明书染色后镜检。G—双球菌涂片，应用滚动式涂片法从波片一端涂向另一端，反复几次，火焰固定后进行革兰染色。 7、对需购买的试剂、平板、培养基、染色液以及需配置的培养基应及时交班。申报室组长、及下午配制人员。 8、对有新到岗的实习或进修人员时，应认