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实验1、普通生物显微镜的使用
实验一、普通生物显微镜的使用(一);一、实验目的:;二、实验原理:;(二)、显微镜的发明:;2. 英国物理学家罗伯特·虎克(Robert Hooke, 1635— 1703)研制出能够放大140倍的光学显微 镜,并用它来观察软木薄片,发现了细胞。;3. 1673年有个名叫列文.虎克(Antoni van Leeuwenhoek)的荷兰人用自己制造的显微镜观察到了被他称为“小动物”的微生物世界。他也被称为微生物的开山祖。
;4. 1938年,德国工程师鲁斯卡( Ernest Ruska, 1906-1988) 制造出世界第一台透射电子显微镜 (TEM)。1952年,英国工程师Charles Oatley 制造出第一台扫描电子显微镜(SEM);(三)、显微镜的分辨率:; 在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头
分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高。
各物镜的镜口率如下表:
物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm)
10× 0.25 5.40
40× 0.65 0.39
100× 1.30 0.11
显微镜的总放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数
公式为: M = K1 × K2
;焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不
仅是这一物点,而且它的上下两侧也
能看清楚的厚度叫做焦点深度。
要看到标本的全厚度,必须调节螺旋
仔细地从上到下进行观察。
;三、材料和仪器:;四、实验步骤:;II .显微镜的使用;2. 使用方法:
(1)低倍镜的使用:观察任何标本,均需从低倍镜
开始。
① 检查:检查显微镜是否完好。
② 准备:将显微镜放于前方略偏左,转动粗调旋钮
将载物台下降,旋转物镜转换器使低倍镜正对通
光孔。
③ 对光:
④ 放标本片:
⑤ 调节焦距
⑥计算放大倍数:;错误原因:如按上述操作,依然看不到图象,
可能有以下原因:
A. 转动调节太快,超过焦点,需重新调节。
B. 物镜未对准通光孔。
C. 标本没放在视野内,需移动标本片寻找观察
对象。
D. 光线太强或太弱。尤其观察透明或未染色标
本时,应将光线调稍暗些,有利观察。
;(2)高倍镜的使用:
① 依照上述操作步骤,先用低倍镜找到清晰物象,② 将需要观察的部分移到视野中央,
③ 眼睛从侧面注视物镜,移动转换器,换高倍镜,④ 看目镜,微调细调旋钮,至看到清晰物象。
;错误原因:如按上述操作,依然看不到图象,
可能有以下原因:
A. 观察的标本不在视野内。应在低倍镜下找到
后,移到视野中央,再换高倍镜观察。
B. 标本放反了。
C. 焦距未调好。;(3)油镜的使用:
① 先用低倍镜观察标本情况。
② 换高倍镜,把需观察的部分移至视野中央。
③ 将聚光器升至最高位置,光圈开至最大。
④ 在盖玻片所要观察的位置滴一小滴香柏油,
放于载物台。
⑤ 把油镜移至工作位置。
;⑥ 慢慢调节粗细调节旋钮,使载物台缓慢上升,同
时细心从侧面观察物镜前端与标本之间的距离。
先使物镜前端与油滴接触,再慢慢上升载物台,
至物镜前端接近而没有碰触到盖玻片为止。(小
心损伤油镜或装片)
⑦ 眼睛从目镜观察,缓慢调节细调旋钮至看清标本(注意只能下降载物台)
;⑧ 观察完毕,下降载物台,使油镜离开光轴,及时做好油镜的清洁工作(先用干净的擦镜纸擦去大部分香柏油,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦拭两次,最后用干的擦镜纸擦拭一次)。
玻片上的油可用“拉纸法”擦去:把一小张擦镜纸盖在载玻片的油滴上,其上滴一两滴二甲苯,趁湿把纸往外拉,连续几次,即可擦净(注意不要使用过多的二甲苯,并及时擦干净上面的香柏油,以免使装片受损)。;注意:如果不出现物象或者目标不理想要重找,A. 在加油区之外重找时应按:低倍→高倍→
油镜程序。
B. 在加油区内重找应按:低倍→油镜程序,
不得经高倍镜,以免油沾污镜头。 ;3. 显微镜使用后的复原:;4、显微镜使用的注意事项
(1)
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