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实验1、普通生物显微镜的使用

实验一、普通生物显微镜的使用(一);一、实验目的: ;二、实验原理:;(二)、显微镜的发明: ;2. 英国物理学家罗伯特·虎克(Robert Hooke, 1635— 1703)研制出能够放大140倍的光学显微 镜,并用它来观察软木薄片,发现了细胞。;3. 1673年有个名叫列文.虎克(Antoni van Leeuwenhoek)的荷兰人用自己制造的显微镜观察到了被他称为“小动物”的微生物世界。他也被称为微生物的开山祖。 ;4. 1938年,德国工程师鲁斯卡( Ernest Ruska, 1906-1988) 制造出世界第一台透射电子显微镜 (TEM)。1952年,英国工程师Charles Oatley 制造出第一台扫描电子显微镜(SEM);(三)、显微镜的分辨率:; 在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头 分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高。 各物镜的镜口率如下表: 物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm) 10× 0.25 5.40 40× 0.65 0.39 100× 1.30 0.11 显微镜的总放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数 公式为: M = K1 × K2 ;焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不 仅是这一物点,而且它的上下两侧也 能看清楚的厚度叫做焦点深度。 要看到标本的全厚度,必须调节螺旋 仔细地从上到下进行观察。 ;三、材料和仪器:;四、实验步骤:;II .显微镜的使用 ;2. 使用方法: (1)低倍镜的使用:观察任何标本,均需从低倍镜 开始。 ① 检查:检查显微镜是否完好。 ② 准备:将显微镜放于前方略偏左,转动粗调旋钮 将载物台下降,旋转物镜转换器使低倍镜正对通 光孔。 ③ 对光: ④ 放标本片: ⑤ 调节焦距 ⑥计算放大倍数:;错误原因:如按上述操作,依然看不到图象, 可能有以下原因: A. 转动调节太快,超过焦点,需重新调节。 B. 物镜未对准通光孔。 C. 标本没放在视野内,需移动标本片寻找观察 对象。 D. 光线太强或太弱。尤其观察透明或未染色标 本时,应将光线调稍暗些,有利观察。 ;(2)高倍镜的使用: ① 依照上述操作步骤,先用低倍镜找到清晰物象,② 将需要观察的部分移到视野中央, ③ 眼睛从侧面注视物镜,移动转换器,换高倍镜,④ 看目镜,微调细调旋钮,至看到清晰物象。 ;错误原因:如按上述操作,依然看不到图象, 可能有以下原因: A. 观察的标本不在视野内。应在低倍镜下找到 后,移到视野中央,再换高倍镜观察。 B. 标本放反了。 C. 焦距未调好。;(3)油镜的使用: ① 先用低倍镜观察标本情况。 ② 换高倍镜,把需观察的部分移至视野中央。 ③ 将聚光器升至最高位置,光圈开至最大。 ④ 在盖玻片所要观察的位置滴一小滴香柏油, 放于载物台。 ⑤ 把油镜移至工作位置。 ;⑥ 慢慢调节粗细调节旋钮,使载物台缓慢上升,同 时细心从侧面观察物镜前端与标本之间的距离。 先使物镜前端与油滴接触,再慢慢上升载物台, 至物镜前端接近而没有碰触到盖玻片为止。(小 心损伤油镜或装片) ⑦ 眼睛从目镜观察,缓慢调节细调旋钮至看清标本(注意只能下降载物台) ;⑧ 观察完毕,下降载物台,使油镜离开光轴,及时做好油镜的清洁工作(先用干净的擦镜纸擦去大部分香柏油,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦拭两次,最后用干的擦镜纸擦拭一次)。 玻片上的油可用“拉纸法”擦去:把一小张擦镜纸盖在载玻片的油滴上,其上滴一两滴二甲苯,趁湿把纸往外拉,连续几次,即可擦净(注意不要使用过多的二甲苯,并及时擦干净上面的香柏油,以免使装片受损)。;注意:如果不出现物象或者目标不理想要重找,A. 在加油区之外重找时应按:低倍→高倍→ 油镜程序。 B. 在加油区内重找应按:低倍→油镜程序, 不得经高倍镜,以免油沾污镜头。 ;3. 显微镜使用后的复原:;4、显微镜使用的注意事项 (1)

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