王金发细胞生物学第2章.ppt

CHAPTER 2;OUTLINE;普通光学显微镜;2.1 TECHNIQUES OF MICROSCOPY;波长与分辨率; 2.1.2 光镜标本制备技术 ? 细胞染色技术 ? 组织固定和切片技术 ? 细胞化学技术 利用 Feulgen反应可特异性检测 细胞中DNA。; 2.1.3 常用光学显微镜 ◆普通双筒显微镜 (binoular microscope) ◆荧光显微镜 (fluorescence microscope) ◆相差显微镜 (phase contrast microscope); 2.1.3 常用光学显微镜 ◆倒置显微镜 ■物镜与照明系统的位置颠倒。 ■集光器与载物台之间的工作距离提高,可以放置培养皿、培养瓶等容器,直接对培养的细胞进行照明和观察。;倒置显微镜; 2.2 电子显微镜 (Electron microscope);2.2.1 电子显微镜概述 ?电子显微镜的基本结构 电子显微镜基本结构由三大部分组成: ●电子光学系统由照明系统、标本室、 成像系统、观察窗和记录用的照相机等 组成； ●真空系统是保持电镜的真空度； ●电子学系统即供电系统，需要高压稳压。;透射电子显微镜;电子染色;电镜样品的制备;2.2.2 Transmission Electron Microscope ◆冰冻蚀刻术(freeze-etching) 是专门观察样品外表面的投影 复型术。;冰冻蚀刻技术; 2.2.3 Scanning Electron Microscope 原理： 目前一般扫描电镜的分辨率约60～100 ?(6～10nm)。;扫描电镜; 2.2.4 Scanning Tunneling Microscope,STM ◆基本原理 ;扫描隧道显微镜工作原理; 2.2.4 扫描隧道显微镜 ?扫描隧道显微术在生命科学 中的应用 ◆DNA结构研究； ◆胶原、纤维和蛋白质结构研究； ◆细胞膜表面结构的研究。;扫描隧道电镜下的DNA双螺旋; 2.3 TECHNIQUES OF  CYTOCHEMISTRY;2.4 Radioautography;放射自显影术; 2.5 分析细胞学技术;流式细胞术;细胞分选;细胞标记;染色体分选;染色体标记;2.6 细胞工程技术(Cell Engineering);Knockout Mice ;基因敲除;基因敲除示意图（1）;基因敲除示意图（2）;基因敲除原理; Knockout Mice ;未来的生物技术