第八章 色谱分析法导论 吴丽荣.ppt

第八章 色谱分析法导论 ;学习目标;主要内容;§8-1 色谱分析法及其基本概念;一、色谱分析法的产生和发展;一、色谱分析法的产生和发展;柱内的填充物称为固定相 s ——（固体或液体） 沿柱流动的物质称为流动相 m——（气体或液体） 装有固定相的柱子称为色谱柱 色谱法：根据混合物各组分在固定相和流动相中的选择性分配的差异，使各组分在色谱柱中的迁移速率不同而获得分离的方法。;色谱法的发展史;二、色谱法的分类;扩展：超临界流体色谱法 (SFC) ;二、色谱法的分类;二、色谱法的分类;小结 色谱法的分类？;小结 色谱法的分类;三、色谱图及常用术语;色谱图产生过程;（二）基本术语;基 线;2.色谱峰 组分流出时，检测器对该组分的响应信号随时间变化形成的峰形曲线，正常的色谱峰为对称的正态分布曲线。 ;3.保留值——定性分析的依据;保留时间tR：组分从进样到出现峰最大值所需的时间 ;调整保留时间t'R;死体积V0;保留体积VR;调整保留体积V'R;总结：;4.分配系数K和分配比k';4.1 分配系数K;分配系数 K的讨论;4.2 容量因子(k’)——分配比 在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的质量之比，称为分配比（容量因子、容量比）;补充： tR、VR与K、k'的关系;§8-2 色谱分析法基本理论;一、 塔板理论;一、 塔板理论; 该理论是把色谱柱比作一个分馏塔，从而把色谱分离过程比作分馏过程。 色谱柱内有很多层分隔的塔板，在每一层塔 板上，组分可达到一次分配平衡。因被分离组分 的分配系数不同，经多次分配平衡后，K小的组 分先流出色谱柱。 只要色谱柱的塔板足够多，组分的K值仅有微小的差别，也可得到较好的分离。 ; 色谱柱长：L 虚拟的每次分配平衡所需的塔板高度：H 色谱柱的理论塔板数：n 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数的计算公式：;有效塔板数( neff)和有效塔板高度(Heff) ;练习1 在一根长3m的色谱柱上分离一样品，得下列数据：空气、组分1及组分2的保留时间分别为1、14、17min，组分2的峰宽为1min。求： （1）组分1和组分2的调整保留时间； （2）用组分2计算该色谱柱的理论塔板数、理论塔板高度。 （3）用组分2计算该色谱柱的有效塔板数、有效塔板高度。 ;练习2 在长为2 m的阿皮松柱，柱温为100℃，记录纸速为2.0cm/min的实验条件下，测得苯的保留时间为1.5min，半峰宽为0.20cm，求理论塔板数和理论塔板高度。 解：;在实验中，如何比较不同色谱柱的柱效？;某人制备了一根色谱柱，用组分Ａ，Ｂ为测试样测得该柱的理论塔板数为４５００和４０００，因而推断Ａ和Ｂ组分在该柱上一定能得到很好的分离，该推断正确吗？;塔板理论的特点和不足：;二、速率理论;其中dp表示固定相的平均粒径大小； λ为填充不规则因子 固定相颗粒越小（dp）越小，填充的越均匀，柱效n越高 ;;减小的方法： ①采用较高的载气流速 ②选择分子量大的重载气（N2） ③采用较低柱温;3. 传质阻抗项：C·u;解释柱填充均匀程度、固定相粒度、流动相种类、流动相流速、柱温、固定液层厚度等对柱效的影响。;三、色谱分离总效能的衡量;1、柱效能和选择性;;R <1.0：两峰部分重叠； R =1.0：分离程度98%，基本分离； R ≥1.5：分离程度达99.8%， 完全分离。;R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志;3、分离度与柱效、选择性的关系;§8-3 定性和定量分析方法;定性分析方法 ;;（1）利用绝对保留值定性（标准物对照法） 在相同色谱条件下，分别测得待测物与标准物的保留值。若相同，则可以初步认为可能是同一种物质；若不同，则肯定不是同一种物质。 要求：同台仪器；操作条件稳定一致；有样品的标准物 ; ;（2）用相对保留值定性;S;（3）用已知物增加峰高法定性;二、 定量分析方法; （1）绝对校正因子 指某组分i的量与检测器响应信号之比：;（2）相对校正因子（f 'i） 在定量分析中常用相对校正因子，即某组分（i）与标准物质（S）的绝对校正因子之比。;2.定量方法; 优点：简便、准确，无需标准物，不必准确称量和准确进样，该法适合于常量物质的定量。 缺点： 1. 要求所有组分没有在柱内分解；所有组分都能流出色谱柱且在检测器上均有响应；各组分峰没有重叠 2.必须已知所有组分的校正因子； 3.不适合微量组分的测定。;; 二氯乙烷 二溴乙烷 四乙基铅;2.定量方法;内标物要满足以下要求;2.定量方法;例：苯甲酸工业粗产品纯度的测定，准确称取工业苯甲酸150mg溶于甲醇中，加入内标物正庚烷50mg，进样测得苯甲酸峰面积175mm2，正庚烷峰面