病毒基因组DNA RNA快速提取试剂盒II操作方法及步骤说明书.docVIP

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp:// PAGE - 3 -  杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp:// PAGE - 1 - ◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成保存50次(RN2201)裂解液VLB室温20 mlPoly Carrier -20℃200μl 去蛋白液RE室温25 ml漂洗液RW室温10 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O室温10 mlRNase-free 吸附柱RA和收集管室温50套室温储存12个月不影响使用效果， 各溶液使用后应及时盖紧盖子。 产品介绍： 采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求， 如病毒RNA：HCV（丙肝病毒）,HIV（艾滋病毒）,和HTLV（人类嗜T淋巴细胞病毒）； 病毒DNA：HBV（乙肝病毒）和CMV（巨细胞病毒）等等。病毒裂解后，DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR/RT-PCR分析。 产品特点： 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。 多次柱漂洗确保高纯度，提取的病毒DNA/RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。 注意事项： 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。 裂解液VLB和去蛋白液RE中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 Poly Carrier： Poly Carrier使用方法：如果起始处理量很少，我们推荐使用Poly Carrier，如果预期有较大量核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入Poly Carrier。使用时在每个样品提取所需裂解液VLB中加入4μl Poly Carrier储存溶液， 将裂解液VLB与Poly Carrier溶液充分颠倒混匀即可(裂解液VLB容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液VLB中加入总共需要的Poly Carrier混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 提示：第一次使用前请先在10ml漂洗液RW中加入40ml无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 200μl血清等体液（需回复到室温，不足可用0.9% NaCl或者PBS补足）转入上述1.5ml离心管，加入400μl 裂解液VLB， 立刻涡旋振荡充分混匀。 如果处理样品量小或者病毒预期浓度较低，建议在400μl裂解液VLB中加入4μl Poly Carrier储存溶液。 室温(15-25℃)放置10分钟，每隔5分钟，振荡混匀一次。 加入450μl无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。 如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。 将上述混合物加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。 如果总体积超过750μl，可分两次将溶液加入同一个吸附柱RA中。 加500μl去蛋白液RE，12,000rpm离心30秒，弃废液。 加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30秒，弃废液，加入500μl漂洗液RW，重复一遍。 将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除