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2017-04-27 发布于湖北
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贴壁细胞系的传代

贴壁细胞系的传代细胞活力分析改编自Freshney, R.I., 1994。动物细胞培养：基本技术手册。第3版，Wiley-Liss，纽约，美国。改编自Freshney, R.I.,1994。动物细胞培养：基本技术手册，第3版，Wiley-Liss，纽约，美国。细胞培养方法介绍概述讨论细胞活力分析可以测定细胞悬液 1.制备用于分析的细胞悬液（大约106 中存活细胞的百分比。一般通过染料个细胞/毫升）。从培养容器中去除培养基，PBS 5.加入含有血清的培养基（3–10mL/75cm2 血清中含有胰蛋白酶的抑制剂。排除的染色方法实现，即具有完整细漂洗一下，将胰蛋白酶加入细胞，孵瓶面积），上下吹打细胞，直到细胞分因此在第2步处理的时候，去除痕量的胞膜的细胞能够将染料排除在外从而 2.制备用0.4%台盼蓝溶液(SV30084.01) 育，加入含有血清的培养基终止胰蛋散成单细胞悬液。血清非常重要。不被染色，而不具备完整细胞膜的细 1：1稀释的细胞悬液。白酶的反应，分散细胞，稀释后放回胞则能够吸收染料而被染色。培养箱。 6.用血球计数板或库尔特粒度仪计数第5步中培养基中含有的血清会使 3.将稀释液加入血球计数板的计数池中并将细胞稀释到合适的接种浓度。残留的胰蛋白酶失活并保护细胞免受用于排除染色法的染料通常选择（见