14、DNA重组技术的基本工具(2016.3张朝露).doc

专题一 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 生物组：张朝露 一、教学目标 1、简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 二、教学重点 DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。 教学难点 基因工程载体需要具备的条件。 三、学习指导 设置问题情境，在思索中学习新知识；让抽象的语言在直观的插图中找到注释，在实际动手中形成正确认识；引导学生从基因工程的整体思考问题。 四、教学过程 【知识点一】基因工程的概念?注意：对本概念应从以下几个方面理解： 操作环境操作对象操作水平基本过程结果 例1．（2005高考广东）以下有关基因工程的叙述，正确的是 （ ） A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强 【知识点二】基因工程的三个基本工具： 1.限制性核酸内切酶---“分子手术刀”来源： 1）功能： 2）切割方式： 2.DNA连接酶——“分子缝合针” 1）分类: 和 2）作用及作用部位： 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1）分子运载车的分类：常用的是 其他载体 2）运载体使用的目的： 3）作为运载体必须具备的条件 【讨论与研究】注意：你知道DNA水解酶、DNA解旋酶、DNA连接酶、DNA聚合酶的区别吗？ （1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基 （2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。 （3）DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。 （4）DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。 注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。 例2．在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是（ ） A．限制酶和连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和运载体 D连接酶和运载体 例3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A．能复制 B．有多个限制酶切点 C．具有标记基因 D．它是环状DNA 例4．右图表示限制酶切割某DNA的过程， 从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（ ） A．CTTAAG，切点在C和T之间 B．CTTAAG，切点在G和A之间 C．GAATTC，切点在G和A之间 D．CTTAAC，切点在C和T之间 【课堂练习】 A级 1．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 2．现有一长度为1000碱基对(bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp，用Kpn1单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ） 3．下列四条DNA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是 （ ） T A G G