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- 2017-05-01 发布于海南
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受体与特定的配体结合典型的配体可以是小离子–铁离子细菌铁受
受體與特定的配體結合
典型的配體可以是
小離子
鐵離子: 細菌鐵受體r
有機分子
腎上腺: 腎上腺素受體
多醣
肝素: 纖維原細胞生長因素
多肽
胰島素:胰島素受體
蛋白質
血管內皮成長因素: VEGF受體
受體結合的研究
過濾器檢測
原理:
平衡與受體結合的標的配體
R + L → RL
(受體+配體→受體-配體複合物)
結合後的複合物會有放射性
游離的受體表示沒有放射性
游離的配體可以通過過濾器
複合物不能通過是因為蛋白質以結合在過濾器上
步驟:
把膜分離
添加配體到膜上
通過過濾器(如濾紙)
洗去沒有結合的配體
測量結合的放射性,這是和複合物的濃度成正比
非專一性結合
問題:
厭水性的配體是非專一性的鑲入膜內
方法:
測量總結合量
在缺乏的受體中測量非專一性結合(NSB)的量
從總結合量減去非專一性結合的量會得到專一性結合的量
分析專一性結合的數據
專一性結合(SB)+非專一性結合(NB)=總結合(Total binding)
數據分析:
確定:
結合常數
受體的數量
點的數量
協同效應
Ka=結合常數,Kd=解離常數
R + L→RL
Ka=[RL]/[R][L]=1/Kd
Ka越大Kd越小,代表結合力越強,親和力越高
Bmax代表結合力最大的點
*結合反應是藉由受體及配體上互補的表面間所產生的非共價鍵結而相互作用
*此種鍵結類似酵素與受質的反應,取
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