动物组织基因组DNA提取试剂盒说明.docVIP

磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒 MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit 【目 录 号】TGDE-5005、TGDE-5030 【运输条件】2~25℃； 【保存条件】磁珠悬浮液 2~8℃，其它组分室温保存； 【试剂盒组成】 Kit Component 试剂盒组成TGDE-5005 （50T）TGDE-5030 （300T） = 1 \* GB3 ① TGDE-Buffer 1 裂解液 120 mL120 mL = 2 \* GB3 ② TGDE-Buffer 2 裂解液 210 mL60 mL = 3 \* GB3 ③ TGDE Magnetic Beads 磁珠悬浮液10 mL60 mL④ Wash Buffer 清洗液35 mL210 mL⑤ Elute Buffer 洗脱液10 mL30 mL 【注意事项】 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，使用前请充分混匀； 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶，如有结晶请置于65℃水浴重新溶解； 在使用本试剂盒前，请用户自配80%乙醇； 如需去除RNA请自备RNase A溶液（100mg/mL, 分散液10mM?Tris-HCl, 1mM?EDTA, pH值8.0）； 本操作指南经本公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南的建议操作。 1 【产品简介】 本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时可以释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。 本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好，适用于各种下游分子生物学实验，如：酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用，实现高通量操作。 【试剂盒说明】 组织样本类型样本量（mg）核酸得量（μg）动物哺乳动物脑3520-30 心脏3520-30肝脏3530-50脾脏3550-70肾3530-50肺3550-70肌肉组织555-15毛发2~50根0.1-3其它组织鱼类555-15虾类555-15贝类5530-60 【自备仪器、耗材及试剂】 仪器自动版 研钵（或组织研磨机、匀浆机）、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。 手动版 研钵（或组织研磨机、匀浆机）、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。 1 【仪器自动版操作步骤】 本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，同步可完成32个样本的提取。 准备96孔板 参照下表向96孔板各孔位中分别加入相应试剂： 2 样本孔位1、72、83、94、105、116、12试剂磁珠悬浮液200μL裂解液2 200μL异丙醇 300μL清洗液600μL80%乙醇600μL80%乙醇600μL洗脱液100μL 注：1）每次吸取磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀；2）为提高效率建议使用排枪。 样本前处理 组织样本： 取适量组织样本，液氮研磨至粉末状。尽可能转移至2.0mL离心管中，加入400μL裂解液1，涡旋振荡1~3min，至组织粉末呈云雾状； 注：针对毛发样本，可剪除毛发根部，毛干部分剪成1~5mm长度。 细胞样本： 用离心管收集组织细胞（细胞个数：5*101~5*107），PBS清洗2次，向收集好的细胞中加入400μL裂解液1重悬细胞，涡旋振荡1~3min。 样本裂解 将离心管置于65℃水浴锅中温浴15min，每隔5min颠倒混匀一次。结束后将离心管12000rpm室温（勿低于15℃）离心5min，待用。 注：如需去除RNA，请额外加入5μL RNase A。 上机提取 将裂解完毕离心管中所有上清液转移至准备好的96孔板第2、8列孔位，然后将96孔板放入ETP-300型核酸提取仪中，插入磁棒套，打开仪器操作软件，调用“动物组织DNA提取实验方法”程序，单击“运行”执行程序。 核酸转移 程序运行完毕，取下96孔板，将洗脱液转移至干净的离心管或者PCR板中，做好标记，-20℃保存备用，此时可以弃去96孔板。 “动物组织DNA提取实