第10章 转基因植物.pptx

第十章;主要内容;一、转基因植物;一、转基因植物;一、转基因植物;技术路线;一、转基因植物;一、转基因植物;一、转基因植物;一、转基因植物;一、转基因植物;（4）卸甲载体：卸甲载体是解除武装的Ti质粒或Ri质粒，其功能是作为构建转化载体的受体质粒。 （5）植物基因转化载体：植物基因转化载体是最后用于目的基因导入植物细胞的载体，故亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构建而成。根据它的结构特点又可分为两种转化载体，即一元载体系统和双元载体系统。 ; ;转基因方法 概括起来说主要有两类： 第一类是外源目的DNA的直接转化。 第二类是以载体为媒介的遗传转化，也称为间接转移系统法。 ;一、转基因植物;一、转基因植物;一、转基因植物;基因枪法;DNA;决定基因枪使用成功的因素;一、转基因植物;化学物质诱导法;化学物质诱导法;一、转基因植物;以野生型根癌农杆菌载体系统为例： 野生型根癌农杆菌Ti质粒大小约200-800kb，其中T-DNA区为12-24kb，vir区有35kb，T-DNA上有tms、tmr和tmt三套基因，分别编码合成植物生长素、分裂素和生物碱的酶。在T-DNA两端各有一个25bp的末端重复序列LB和RB，在T-DNA的切除及整合过程中起着重要作用。;T-DNA区可高效整合到植物受体细胞的染色体上并得到表达。利用这一特点，将目的基因转入Ti质粒的T-DNA区构建根瘤农杆菌的转化载体。 ;根癌农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens),是一种革兰氏阴性土壤杆菌,它含有Ti质粒,能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤,即诱发冠瘿瘤。Ti质粒(包括Ri质粒)上有一段转移DNA,在农杆菌侵染宿主植物时,这段DNA可以转移进植物细胞,并稳定地保留在植物细胞染色体中,变为植物细胞新增加的一群基因,最终能通过有性世代遗传给子代 。;;;Vir区（virulence region）： 该区段上的基因能激活T-DNA转移，使农杆菌表现出毒性，故称之为毒性区。T-DNA区与Vir区在质粒DNA上彼此相邻，合起来约占Ti质粒DNA的三分之一。 ;Ti质粒的基因位点及其功能区域 T-DNA区（transferred-DNA regions）： T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA，故称之为转移DNA。该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。 ;载体介导法;农杆菌介导法转基因的基本流程及优化策略;2N6诱导愈伤 7-10d;1 2N6愈伤诱导;载体介导法;载体介导法;T-DNA contains: 1) opine systhesis genes 2) iaaM, iaaH—auxins 3) iptZ--phytohormone;载体介导法;共整合载体和农杆菌质粒重组过程;Ti质粒介导的共整合转化系统;Ti质粒介导的共整合转化系统;载体介导法;Ti质拉介导的二元整合转化系统; 花粉管通道法;病毒感染法;转基因植物鉴定;转基因植物鉴定;转基因植物鉴定;转基因植物鉴定; Transgenic calli showing GUS expression. ; Transgenic rose somatic embryo Transgenic apple shoot ;荧光素酶基因在烟草中（1986）;;核酸检测方法;PCR检测流程示意图;定性PCR检测;PCR检测优点;基因改良植物;（一）抗虫害植物;（一）抗虫害植物;分离毒素蛋白基因;;实例：抗甲虫转基因马铃薯; 遭受虫害的普通玉米 抗虫的Bt转基因玉米;能杀死棉铃虫的棉花;（二）抗除草剂植物;实例：抗除草剂甘膦转基因大豆;转基因植物的生产实践：; （三）高品质植物;（三）高品质植物;高品质转基因食品;（四）转基因植物生物制药;（四）转基因植物生物制药;（四）转基因植物生物制药;表10-1 应用转基因植物生产的一些药物;转基因植物的安全性问题;(一)环境释放安全性; 转基因食品 ;安全与否;绿色和平组织将转基因食品妖魔化;绿色和平组织抗议雀巢咖啡事件;转基因玉米闯了祸;抗虫玉米与大花斑纹蝴蝶; 斑蝶事件： 1999年5月，康奈尔大学的一个研究组在《Nature》杂志上发表文章，声称转基因抗虫玉米的花粉飘到一种名叫“马利筋”的杂草上，用马利筋叶片饲喂美国大斑蝶，导致44％的幼虫死亡。 这一实验结果在科学上没有说服力：玉米的花粉非常重，扩散不远，在玉米地以