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种子的扩大培养和灭菌
种子的扩大培养 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 种子的扩大培养 种子制备的技术概要 灭 菌 污染杂菌的危害 防止杂菌污染的措施 灭菌的方法 培养基的湿热灭菌 空气的除菌 1、污染杂菌的危害 使生物化学反应的基质或产物消耗,造成产率下降; 杂菌所产生的某些代谢产物,或染菌后发酵液的某些理化性质的改变,使产物的提取变得困难,造成收得率降低或产品质量下降; 杂菌可能会分解产物; 杂菌大量繁殖,会改变反应介质的pH,使生化反应发生异常变化; 发生噬菌体污染。 2、防止杂菌污染的措施 设备灭菌并确保无泄漏 所用培养基必须灭菌 通入的气体应经除菌处理 种子无污染,确保纯种 培养过程中加入的物料应经灭菌处理,并在加入过程中确保无污染 3、灭菌的方法 化学灭菌 射线灭菌 干热灭菌 湿热灭菌 过滤除菌 化学灭菌 一些化学试剂能使微生物中的蛋白质、酶及核酸发生反应而具有杀菌作用。 常用的化学药剂有甲醛、氯、高锰酸钾、环氧乙烷、季铵盐、臭氧等。 化学药剂也会与培养基中的一些成分作用,而且加入后不易除去,一般不用于培养基的灭菌。 射线灭菌 即利用紫外线、高能电磁波或放射性物质产生的γ射线进行灭菌的方法。 波长为(2.1-3.1)×10-7m的紫外线具有灭菌作用,最常用的波长是2.537×10-7m但紫外线穿透能力低,仅用于表面消毒和空气的消毒。 干热灭菌 常用的干热条件为在160℃下保温1h,灭菌效果不如湿热灭菌。 一般要求保持干燥的实验器具和材料(培养皿、接种针、固定化细胞用的载体材料等)可用干热灭菌。 湿热灭菌 即利用饱和水蒸气进行灭菌。 蒸气有很强的穿透力,在冷凝时放出大量冷凝热,很容易使蛋白质凝固而杀灭各种微生物。同时,整齐价格低廉,来源方便,灭菌效果可靠。 培养基灭菌、发酵设备及管道灭菌、实验用器材的灭菌,普遍采用湿热灭菌。 通常的灭菌条件是在121℃维持30min。 过滤除菌 即利用过滤方法截留微生物,达到除菌的目的。 本法只适用于澄清流体的除菌。 工业上利用此法大量制备无菌空气,供耗氧微生物的深层培养使用。 热敏性培养基也采用过滤方法来除菌。 产品提取过程中,也可用此法处理料液,获得无菌产品。 4、培养基的湿热灭菌 4、培养基的湿热灭菌 4、培养基的湿热灭菌 即将配制好的培养基放在发酵罐或其他容器中,通入蒸气将培养基和所用设备一起灭菌的操作过程,也称实罐灭菌。 过程包括升温、保温(121℃,30 min)和降温三个阶段,灭菌主要在保温过程实现。 显著缺点是对培养基成分破坏大、升降温时间长。 4、培养基的湿热灭菌 将配制好的培养基在通入发酵罐前进行加热、保温、降温的灭菌过程,也称之为连消。 连续灭菌时,培养基在短时间内被加热到灭菌温度(130~140℃),短时间保温后(5~8 min),被快速冷却,再进入早已灭菌完毕的发酵罐。 以高温、快速为特征,具有对培养基破坏小,可以实现自动控制、提高发酵罐的设备利用率、蒸汽用量平稳等优点。 5、空气的除菌 流量:连续提供一定流量的压缩空气,单位时间(min)单位体积(m3)培养基中通入标准状况下空气的体积(m3)一般为0.1~0.2。 压强:表压为0.2~0.4MPa. 进入过滤器前,相对湿度φ≤70%,以防止过滤介质受潮。 温度可比培养温度高10~30 ℃。 洁净指标:每立方米空气中,尘埃粒子数最大允许值≥0.5μm的为3500, ≥5μm的为0,微生物最大允许数为5个浮游菌/m3,1个沉降菌/m3 5、空气的除菌 5、空气的除菌 粗过滤器:拦截空气中较大的灰尘以保护空气压缩机,同时也有一定除菌作用。 空气压缩机:提供动力,克服随后各设备的阻力。 空气贮罐:消除压缩空气的脉动。 冷却器:空压机出口气温一般在120℃左右,必须冷却,此外还可达到降湿的目的。 旋风分离器:除去压缩空气中的较大的水滴和油滴,保护过滤介质。 丝网分离器:除去旋风分离器无法除去的更小的雾滴。 加热器:从丝网分离器中出来的空气,相对湿
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