同型半胱氨酸水平升高对冠心病的影响.docVIP

　　同型半胱氨酸水平升高对冠心病的影响 作者：鲁洋 李淑梅 张小昊 吴迪 【关键词】 同型半胱氨酸；冠心病；影响 近年来国内外大量研究已经证实，血中同型半胱氨酸（HCY）升高是冠心病新的独立危险因素，HCY浓度的升高增加了罹患冠心病的危险性，并增加不良事件发生的几率，但HCY浓度正常高值对冠心病的发生是否有影响，目前未见这方面的报道。本研究主要探讨HCY在正常范围内升高与冠心病的关系。 　　 1 对象与方法 　　1.1 研究对象 2006年3月至2006年10月在我院心内科住院的病例资料完整的患者53例，其中男34例，女19例。所有患者均行冠脉造影检查且HCY浓度在正常范围内。排除肝、肾衰竭、甲状腺功能低下、恶性贫血、急性淋巴性白血病，癌症（如乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌）；半年之内未服用维生素、叶酸等影响血中HCY浓度的药物〔1〕。根据造影结果，将无狭窄或狭窄lt;50％者共30例确定为对照组；将左冠脉主干（LM）、左前降支（LAD）、左回旋支（LCX）及右冠脉（RCA）中至少一支狭窄gt;50％者共23例确定为冠心病组。再将冠心病组分为1支病变组（LAD、LCX、RCA中有1支病变），11例；2支病变组（LAD、LCX、RCA中有2支病变或LM病变者均为2支病变组），5例；3支病变组，（LAD、LCX、RCA中有3支病变或LM病变同时合并RCA病变归为3支病变组），7例。 　　1.2 研究方法 受检患者清晨空腹抽取外周静脉血4 ml，加入2％乙二胺四乙酸（EDTA）Na2 0.5 ml抗凝，2 h内离心（5 000 r/min，4℃，10 min），分离血清，－20℃保存备用。采用酶联免疫分析法(ELASA)〔2〕进行测量。使用ELASA试剂盒（美国华盛顿TIP公司生产），操作步骤按试剂盒说明书进行。测双孔OD值,结果取两孔的平均值绘制标准曲线。 　　将样品（血清）稀释101倍（5 μl血清加500 μl样品稀释液），标准品不稀释（已稀释101倍）。分别加入10 μl标准品、已稀释血清于反应板孔中。空白孔内加入10 μl样品稀释液。每孔加入100 μl酶联免疫物，轻混匀30 s。水浴箱25℃温浴1 h。甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板，并除去水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；这样反复洗涤5次。每孔加入100 μl 四甲基联苯胺（TMB）显色液，轻轻混匀10 s，水浴箱25℃温育20 min。每孔加入100 μl终止液。轻轻混匀30 s；确定蓝色变为黄色。30 min内在450 nm处读OD值。标准品OD值取相同浓度两孔的平均值，得出标准品与HCY浓度对应的数据，见表1。以标准品的OD值为纵坐标（y轴），以标准品HCY浓度（μmol/L）为横坐标（x轴），绘制标准曲线。见图1。 　　根据两点求直线得出每段的直线方程： 　　①y=1.158x （OD≤0.142） 　　②y=0.082x+0.068 (0.142＜OD≤0.216) 　　③y=0.143x-0.042 (0.216＜OD≤0.602) 　　④y=0.108x+0.116 (0.602＜OD≤1.088) 　　⑤y=0.0756x+0.4072 (1.088＜OD≤1.768) 　　⑥y=0.054x+0.796 (OD＞1.768) 根据血清样品的OD值所在范围找出其对应的直线方程， 计算 出其HCY浓度（根据Y值求出X值，即为HCY浓度）。 　　HCY浓度 参考 值：5～15 μmol/L。本试剂盒灵敏度：0.2 μmol/L。　　表1 标准曲线数据（略） 　　图1 标准曲线图（略） 　　1.3 统计学处理 采用SPSS11.0软件，计量资料以x±s表示，比较用方差分析及t检验，计数资料比较用χ2检验。 　 　2 结果 　　当HCY浓度在正常范围内时,冠心病患者的HCY水平（6.325±4.430） μmol/L明显高于对照组（3.756±3.722） μmol/L（Plt;0.01）。0、1、2、3支病变组HCY浓度呈递增趋势〔分别为(3.756±3.722) μmol/L、(4.223±3.756) μmol/L、(9.778±3.229) μmol/L、(10.153±4.753) μmol/L〕。其中2支病变组、3支病变组与对照组比较差异均有统计学意义（Plt;0.01），1支病变组与对照组比较无统计学意义。 　 　3 讨论 　　近年来有大量研究已经证实，血中HCY升高是冠心病新的独立危险因素〔3〕。Boushey等〔4〕指出普通人群冠心病的危险性10％的原因是HCY，冠心病的危险性随着血中HCY浓度的增高相应增加。Nygard等〔5〕对587例冠脉造影确诊为冠心病的患者血清中HCY的浓度进