茎叶人参皂苷对大鼠急性肺损伤肺组织TNF.docVIP

　　茎叶人参皂苷对大鼠急性肺损伤肺组织TNF 作者：毛毅敏，孙瑜霞，王学廷，单世民 【摘要】 　　 　　摘要：目的研究茎叶人参皂苷对内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量及白细胞介素-8（IL-8）表达的干预作用。方法采用内毒素诱导急性肺损伤大鼠模型，随机分为正常对照组（NS组），模型组（ALI组），皂苷组（GS组）。观察茎叶人参皂苷对内毒素诱导大鼠急性肺损伤肺组织TNF-α含量及IL-8表达的影响。结果①与NS组比较，ALI组肺组织TNF-α显著增高(Plt;0.01)；与ALI组比较，GS组肺组织中TNF-α显著低于ALI组(Plt;0.01)。②与NS组比较，ALI组IL-8的表达增高（Plt;0.05）；与ALI组比较，GS组表达减低，差异有统计学意义（Plt;0.05）。结论茎叶人参皂苷可降低肺组织中TNF-α的含量，抑制急性肺损伤大鼠肺组织IL-8的表达。 【关键词】 急性呼吸窘迫综合征； 急性肺损伤； 茎叶人参皂苷； 内毒素； 肿瘤坏死因子-α； 白细胞介素-8 急性肺损伤ALI/ARDS实际上是一种炎症反应，炎症因子增高伴有抗炎因子表达的下降是其发病机制的关键。肿瘤坏死因子（TNF-α）作为主要的前炎性因子，是炎性反应中释放最早和最重要的内源性介质。白细胞介素-8（IL-8）属于炎症介质，是一种具有活化、趋化作用的细胞因子，研究表明白细胞介素-8是ALI/ARDS发病机制的一个重要环节。本研究旨在通过内毒素诱导急性肺损伤模型的复制，通过检测肺组织TNF-α及肺IL-8水平，探讨茎叶人参皂苷是否能通过影响细胞因子的水平进而有效地减轻ALI时的炎症反应。 　 　1 材料 清洁级健康Sprague Daa公司提供；茎叶人参皂苷粉剂(stems and leaves Ginsenoside)由辽宁大 自然 生物科技公司提供；白细胞介素-8(interleukin-8)兔抗鼠单抗由上海麦莎生物科技公司；TNF-α放射免疫药盒由上海赛百胜生物工程公司提供。 　 　2 方法 　　2.1 分组及模型建立 　　清洁级SD雄性大鼠45只，体质量（300±40）g，以随机数字法分3组：正常对照组（NS组），模型组（ALI组），皂苷组（GS组），每组15只；大鼠禁食6 h，自由饮水，称重后，暴露尾静脉，各组注药均由尾静脉注入。NS组和ALI组注入生理盐水1 ml，GS组注入茎叶人参皂苷溶液（生理盐水稀释）100 mg·kg-1·ml-1，45 min后，NS组大鼠尾静脉注入1 ml生理盐水，ALI组、GS组均将LPS 5 mg/kg溶解于1 ml生理盐水由尾静脉注入。 　　2.2 观察指标5 h后，观察各组大鼠的一般状况；腹主动脉取血（1∶500 U肝素抗凝）行血气分析，腹主动脉放血处死大鼠；取大鼠左下肺组织 计算 肺系数；取左上肺进行TNF-α测定；取右肺组织肉眼观察和病理HE染色200×光镜下观察；免疫组化SABC法检测各组肺组织白细胞介素-8,病理图像分析系统测定肺组织中IL-8的平均灰度值。 　　2.3 统计学计量资料数据以±s表示。采用单因素方差分析（one-. 　 　4 讨论 　 　　ALI的特征是由肺间质急性炎症反应而导致的肺内皮和上皮细胞屏障损伤，而炎性因子作为重要的信号因子，启动、放大和延续全身或局部的炎症反应。在ALI早期，有两个主要的前炎性因子，其中之一就是TNF-α［1］。TNF-α是炎性反应中释放最早和最重要的内源性介质。TNF-α既可以直接损伤血管内皮细胞、增加其通透性，又可进一步诱导肺泡上皮细胞产生其他的细胞因子和趋化因子，如IL-1，IL-6等。TNF-α对细胞的功能起着多效和重叠的生化效应，在淋巴细胞黏附至内皮细胞表面和渗透到组织的过程中，表达对此过程起关键作用的细胞表面黏附因子，诱导产生典型的中性粒细胞趋化因子，激活中性粒细胞脱颗粒并产生组织损伤。本实验中，ALI组肺组织TNF-α的含量增加，说明TNF-α可导致ALI的炎症反应。其可能机制为：TNF-α作为诱导剂，促进iNOS mRNA表达，导致iNOS合成增加，使NO生成增加，从而触发强烈的细胞毒作用。另外，TNF-α还可以诱导ET的生成， 促进PMN的聚集，进一步加重肺水肿的程度。 　　IL-8被认为是引起ALI/ARDS的最重要细胞炎症因子之一，由多种参与炎性反应的细胞产生，如巨噬细胞、中性粒细胞、 淋巴细胞和内皮细胞等，是最强的PMN和T淋巴细胞激活和趋化因子，它的主要作用是激活和趋化吸引中性粒细胞到炎症部位，而且能够促进中性粒细胞激活，触发脱颗粒，表面黏附分子的表达及活性氧分子产物释放，是中性粒细胞激活和迁移的重要调节因子［2］。细胞因子IL-8的趋化作用，使