草珊瑚颗粒提取工艺优选及异秦皮啶含量测定.docVIP

　　草珊瑚颗粒提取工艺优选及异秦皮啶含量测定 【摘要】 目的：优选草珊瑚颗粒最佳提取工艺。 方法 ：采用正交试验及HPLC法，以出膏率及异秦皮啶含量为综合考察指标，优选最佳提取工艺。结果：最终确定的提取工艺方法为：加12倍水提取3次，第1次2h，第2次及第3次1h。结论：为制剂的生产及质量控制提供了合理的量化指标及 理论 依据。 【关键词】 草珊瑚颗粒 提取工艺 异秦皮啶 含量测定 草珊瑚颗粒由单味中药草珊瑚经水提得到的浸膏及适量的辅料组成，用于 治疗 风热感冒、急性咽炎等症具有良好的临床疗效。草珊瑚药材中异秦皮啶含量较高，具有显著的抗菌、抗癌作用，是草珊瑚的主要有效成分之一。为此，我们以出膏率及异秦皮啶含量为综合考察指标，采用正交试验法对草珊瑚的提取工艺进行优选，并对经中试放大工艺制备的草珊瑚颗粒进行了异秦皮啶的HPLC含量测定。 1 仪器、材料与试剂 1.1 仪器 HP1100高效液相色谱仪：G13119700四元泵，G131497003UV紫外检测器，G2170色谱工作站。 1.2 材料与试剂 草珊瑚，由江西安远金树苗圃基地提供，经本所张金亭 研究 员鉴定为Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai.。　　异秦皮啶对照品购自 中国 药品生物制品检定所(批号：110837-200304)。　　乙腈，磷酸，甲醇为色谱纯，其余均为 分析 纯。 2 方法与结果 2.1 提取工艺研究 在预试验的基础上选择加水量、提取时间及提取次数这个 影响 因素为考察对象。取草珊瑚药材300g，每组试验3个平行样，加热回流提取。以干浸膏重及异秦皮啶含量为考察指标，每个因素各取3个水平，选用L9(3)4正交试验表设计因素水平，由各因素极差确定因素影响主次及最佳水平，并用方差分析评价各因素对制备工艺影响的显著性，见表1、表2、表3、表4。 从以上结果可以看出，影响因素大小为C＞A＞B。提取次数的变化对结果差异显著，因此选择提取3次。加水量的变化亦对结果同样显示差异显著，我们将加水量确定为12倍水。提取时间对结果无显著影响，我们将提取时间确定为第1次2h，第2次及第3次1h，最终确定的提取工艺方法为：12倍水提取3次，第1次 表1 正交试验因素及水平设计表3 以干膏量为考察指标方差分析结果表4 以异秦皮啶含量(mg)为考察指标方差分析结果2h，第2次及第3次1h。 2.2 异秦皮啶含量测定 2.2.1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 以乙腈-0.1%磷酸溶液(20：80)为流动相，检测波长为344nm, 理论 塔板数按异秦皮啶峰 计算 应不低于4000。　　经 方法 学考察，其线性关系回归方程为：Y=2729.2X－1.6951，r=0.9999。异秦皮啶在0.014～0.21μg之间呈良好的线性关系；精密度RSD为0.52%；稳定性试验8h内RSD为1.14%；重复性试验RSD为0.86%；平均回收率RSD为0.75；阴性对照无干扰。 2.2.2 对照品溶液的制备 取异秦皮啶对照品17.5mg，精密称定，置500ml量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每ml含异秦皮啶4.2μg的溶液，即得。 2.2.3 供试品溶液的制备 取装量差异下的草珊瑚颗粒，研细，取75mg，精密称定,置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300in，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.2.4 含量测定 取供试品溶液及对照品溶液各10μl,注入液相色谱仪中,测定结果见表5。表5 5批样品的含量测定结果结果表明：5批样品平均每袋含异秦皮啶2.18mg，批间含量差异不大。 3 讨论 依据实验室小试确定的提取工艺方法，我们对草珊瑚颗粒进行了5批中试放大试验,投料量为每批50kg。批次间出膏量较为稳定，制得的草珊瑚颗粒每袋重3g，其中含干浸膏1g，含量测定结果RSD为1.45%,表明批次间异秦皮啶含量比较稳定。优选的提取工艺及含量测定方法为 工业 化生产及质量控制提供了有效保障。