药用石斛种间有性杂交育种阶段性初报.docVIP

　　药用石斛种间有性杂交育种阶段性初报 作者：潘春香 白音 包英华 范美玲 【摘要】 　　目的探索石斛种之间有性杂交的亲和能力。方法选用种间性状差异较大、花期相近的4种药用石斛种为材料，在蕾期和花期分别进行人工辅助自交和杂交试验。结果药用石斛种与种之间亲和力较高，各组合杂交结果率达16.6%～75.0%；花期人工自交和杂交的结果率均比蕾期高，其中花期的自交结果率在25.0%～75.0%，杂交结果率达16.6%～50.0%，蕾期的自交结果率为14.2%～50.0%，杂交结果率为16.6%～33.3%；而 自然 授粉的结果率均为0。结论人工辅助授粉是提高药用石斛结果率的有效方法之一。该研究为药用石斛的有性繁殖和杂交育种工作的开展奠定了基础。 【关键词】 药用石斛； 种间； 有性杂交； 育种 石斛属Dendrobium S crepidatum Lind1．ex Paxt，鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.，细茎石斛Dendrobium moniliforme （L.）S nobile Lindl 4个种为亲本。 　　1.2 人工自交与杂交实验实验分为蕾期自交、蕾期杂交、花期自交、花期杂交和自然授粉5种方式进行授粉。以自然授粉为对照。其中花期授粉：选当天开放的花朵进行授粉，具体操作是在头一天选择第2天开放的花朵进行自交和杂交；蕾期授粉：选即将开放的大花蕾，去雄，取新鲜的花粉进行自交和杂交；授粉时将花粉置于母本的蕊腔中。用标签写明自交和杂交时间以及杂交组合名称，挂在母本植株上。授粉3～4 d后，蕊柱膨大，花瓣和花萼开始凋谢。自然授粉是不进行人工辅助授粉，任其自然授粉。 　 　2 结果 　　2.1 四种药用石斛植物学特征和生物学特性观察结果见图1与表1。表1 4种药用石斛开花生物学特性（略） 　　1号石斛：花瓣质厚，有蜡质光泽。茎圆柱形，长者可达45 cm。茎淡青绿色。总状花序，花1～3朵；花径3～4 cm，淡玫瑰红色。唇瓣中部以上是淡玫瑰色，以下是金黄色，有2紫色纵条纹。花期4～5月，花持续开1～3周。 　　2号石斛：茎直立，纺锤状，肉质，具2～5节；叶互生，长圆形，长达19 cm，宽2～3.5 cm，先端急尖而有钩转；总状花序在近茎端位置长出，通常疏生8～15枚花，总状花序近顶端叶腋发出，有花5～8朵，花瓣金黄色，唇瓣金黄色，质厚，茎部有一花柢，唇瓣近肾形，暗黄色或中央有一深色斑，边缘波状。花期4～5月。 　　3号石斛：茎高10～20 cm。叶长圆状披针形，长2.5～4 cm，宽7～10 mm，先端钝；叶鞘非灰色不清洁状。总状花序具花2～4朵；花白色，直径约2 cm；中央萼片线状披针形，两侧萼片稍带镰刀形；唇瓣黄绿色，中央有1褐色的斑点。花期4～5月。 　　4号石斛：茎丛生，上部稍扁而稍弯曲上升，高10～60 cm，粗达1.3 cm，具槽纹，节略粗，基部收窄。叶近革质，长圆形或长椭圆形，长6～12 cm，宽1～3 cm，先端2圆裂，花期有叶或无叶。总状花序有花1～4朵；花大，下垂，直径达8 cm，花被片白色带浅紫色，先端紫红色；唇瓣倒卵状矩圆形，长4～4.5 cm，宽3～3.5 cm，先端圆形，唇盘上面具1紫斑。花期4～5月。 　　2.2 人工杂交授粉实验见表2～3。表2 4种药用石斛自交及杂交组合方式（略） 　　由表3可见，总体来看，花期人工自交和杂交结实率比蕾期的高，这是符合一般植物的开花生物学特性的。从人工辅助自交结实率来看，不论是蕾期还是花期均以2号最高，1号次之。其中蕾期2号高达50.0%，1号达25.0%，3号和4号相近，分别为14.2%和16.6%；花期2号高达75%，1号为60%，3号为50%，4号较低为25%；由此可见，石斛不同种的结实率是有差异的，2号和1号石斛两个种的自交结实能力较强，适宜于自交繁殖。从杂交结果来看，蕾期杂交结实率以3号×1号、4号×3号、1号×3号最高，达30.3%，2号×3号为25%，3号×4号、1号×4号、4号×1号为20%；花期杂交结实率以3号×1号、3号×4号、4号×3号最高，分别达50%，其次是1号×3号和2号×3号，达40%，1号×4号，4号×1号为25%，最低为2号×1号，为16.6%。由此可见，4个种相互杂交都可以结实，说明石斛种之间亲和力较强，适合于种间杂交，尤其是3号×1号和4号×3号这两个组合的亲本的亲和力更强。而 自然 授粉的对照组的四个石斛种的结果率均为0，验证了药用石斛在无外力辅助授粉时几乎不能结实［4］这一现象。而且，在实验过程中我们观察到，对照组的所有花朵在自然脱落时，其药帽还紧包在花粉上完好无损，我们认为这就是石斛自然授粉不易结实的原因。表3 4种药用石斛人工自交、杂交与自然授粉的结果率（略） 　 　3