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蒙药阿给生药及炭药中总黄酮的含量测定.doc
蒙药阿给生药及炭药中总黄酮的含量测定
作者:张婉,唐丽,谢坤,崔箭
【摘要】 目的对蒙药阿给生药及炭药中的黄酮类成分进行初步的定性、定量分析。方法采用显色反应进行定性检识,并以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果 阿给生药及炭药均含有黄酮类成分,但两者所含主要黄酮类成分的类型有所差异;生药与炭药的总黄酮含量分别为4.78%,2.26%,生药总黄酮含量约为炭药的2倍。结论炮制对阿给药材中黄酮类成分类型及总黄酮含量有一定的影响。分光光度法简便灵敏,重现性良好,适用于阿给总黄酮的含量测定。
【关键词】 蒙药阿给; 总黄酮; 定性检识; 含量测定
Abstract:ObjectiveTo identify and determine the total flavonoids in raples easured through UV spectroscopy using rutin as control. ResultsThe main species of flavonoids in rae effect on the species and the content of total flavonoids in Agei. Spectrophotometry ethod for content determination of total flavoniods.
Key ination
阿给为菊科蒿属植物冷蒿Artemisia frigida ETTLER TOLEDO公司);旋转蒸发仪(德国Heidolph公司);6202型高速粉碎机(北京环亚天元机械技术有限公司);索氏提取器(北京博美玻璃仪器厂)。
1.2 材料蒙药阿给(冷蒿)购自内蒙古药材采购供应公司,内蒙古自治区中蒙医 医院 蒙药药房鉴定,炭药由北京普生霖药业有限公司按 2.3 总黄酮的含量测定[6] 以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定阿给生药及炭药中的总黄酮含量。
2.3.1 芦丁标准储备液的配制精密称取120 ℃减压干燥至恒重的芦丁标准品10 mg,置于100 ml容量瓶中,加适量70%乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,得0.1 mg·ml-1的芦丁标准储备液。
2.3.2 最大吸收波长的选择分别量取2.0 ml芦丁标准储备液和样品液置于3支10 ml试管中,加入3 ml 70%乙醇, 摇匀后加入5%亚硝酸钠0.3 ml,摇匀,放置6 min,加入10%硝酸铝溶液0.3 ml,摇匀,放置6 min,再加入4%氢氧化钠溶液1 ml,摇匀,放置15 min后,以相应的试剂做空白对照,在分光光度计上进行全波长扫描,比较标准品和样品的扫描曲线,确定以510 nm为最大吸收波长来进行阿给总黄酮含量的测定。
2.3.3 标准曲线的绘制精密量取芦丁标准储备液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 ml,分别置于10 ml试管中,加70%乙醇补足5 ml,按“2.3.1”项所述的方法进行显色,以溶剂为空白对照,在紫外可见分光光度计上于510 nm波长处测定吸光度。结果见表2。
表2 芦丁标准品浓度与吸光度(略)
以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C)为横坐标绘制标准曲线,用最小二乘法做直线回归,得回归方程A=10.942C+0.001 9,R2=0.999 6。结果表明芦丁在0.015~0.076 mg·ml-1浓度范围内具有良好的线性关系见图1。
2.3.4 精密度实验取同一供试品溶液按上述方法在波长510 nm处,以试剂空白为参比,重复测定5次, 计算 得RSD=0.40%(n=5),结果表明仪器的精密度良好。
2.3.5 稳定性实验对同一供试品溶液,每间隔15 min测定吸光度,考察其在1 h之内的稳定性,计算得RSD=2.51%。结果显示,随着显色时间的延长,所测得的总黄酮含量呈缓慢下降趋势,但在1 h内基本保持稳定,可满足测定要求。
2.3.6 重复性实验取同种阿给药材粗粉,按“2.2”项下方法平行制备5份样液,进行含量测定,计算得RSD=1.40%(n=5)。结果表明,本实验方法的重复性较好。
图1 芦丁标准曲线(略)
2.3.7 加标回收实验精密量取适量阿给提取液(生药2 ml,炭药3 ml )各4份,分别置于10 ml试管中,按下表精密加入一定体积的 0.1 mg·ml-1的芦丁标准储备液,再加70%乙醇补足体积5 ml,照前述方法进行含量测定,代入标准曲线回归方程计算回收率,结果见表3。
2.3.8 样品总黄酮含量的测定精密量取适量体积(V)的阿给提取液(生药2 ml,炭药3 ml)各5份,分别置于10 ml试管中,按标准曲线测定方法进行含量测定,根据回归方程及
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