蓖麻油甾醇组成及其对大鼠蜕膜细胞的影响.docVIP

　　蓖麻油甾醇组成及其对大鼠蜕膜细胞的影响 作者：张小雪 段双全 韩峰 高平 刘世贵 【摘要】 　　目的进一步探明蓖麻油中的抗生育物质成分。方法利用皂化和萃取,从蓖麻油中提取甾醇,用GC-MS分析蓖麻油甾醇成分；用MTT法检测蓖麻油甾醇对原代培养大鼠蜕膜细胞活力的影响。结果蓖麻油总甾醇的主要成分为γ-谷甾醇（43.02%）、豆甾醇（27.15%）、岩藻甾醇（11.43%）、麦角甾-5-稀-3 -醇（6.00%）和普罗布考（7.46%）。蓖麻油甾醇对细胞活力有抑制作用，其半抑制剂（IC50）剂量为：(88.45±3.196) μg/ml,r=+0.9549；抑制作用具有量-效关系。结论在蓖麻油甾醇的主要成分中，γ-谷甾醇（r-Sitosterol）可能是抑制原代培养大鼠蜕膜细胞活力的主要成分，而豆甾醇（stigmasterol）可能起协助的作用。 【关键词】 蓖麻油 甾醇 原代培养大鼠蜕膜细胞 气相色谱-质谱联用分析 四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 　　Abstract：ObjectiveTo assay the constituents of phytosterol of castorbean seed oil and the inhibition on the viability of primary cultured rat decidual stormal cells (DSC). MethodsThe methods of GC-MS analysis and MTT method ain constituents of phytosterol of castorbean seed oil asterol (27.15%), Fucosterol (11.43%), Probucol (7.46%) and Ergost-5-en-3-ol (6.00%); the phytosterol possessed inhibitory activity on the viability of primary cultured rat DSC in a dose dependent manner. The IC50 l, r= +0.954 9. Conclusion The γ-Sitosterol may act as the main contributor in the inhibition on the viability of DSC，and the Stigmasterol might act as an assistant. 　　Key ary cultured rat decidual stormal cells; GC-MS analysis; MTT method 　　蓖麻Ricinus munis L.为大戟科一年生或多年生草本植物，原产于非洲，我国各地均有栽培。蓖麻不仅是著名的油料作物，而且是重要的中药材。在我国，蓖麻籽具有消肿拔毒、泻下通滞、消除痈疽肿毒、导泻等［1］功能，临床上用蓖麻油炒鸡蛋进行催产已有多年的 历史 ［2，3］；在一些非洲国家，妇女用蓖麻籽进行避孕［4］。有 　　 2 结果 　　2.1 蓖麻油甾醇的GC-MS分析结果对蓖麻油甾醇进行GC-MS分析，所得9个峰中鉴定出7种成分（图1和表1）。 已鉴定的化学成分约占甾醇的77.78%，其主要成分为γ-谷甾醇（43.02%）、豆甾醇（27.15%）、岩藻甾醇（11.43%）、普罗布考（7.46%）和麦角甾-5-稀-3 -醇（6.00%）。 3种含量较多物质的MS图谱见图2。 　　2.2 蓖麻油甾醇对大鼠蜕膜细胞活力的抑制作用蓖麻油甾醇对大鼠蜕膜细胞活力有抑制作用，且抑制作用具有良好的量-效关系（图3）。根据线性回归方程Y = 0.206 4X + 31.743 计算 出其半抑制剂量（IC50）为（88.45±3.196）μg/ml，r=+0.9549；而阳性对照米非司酮的半抑制剂量（IC50）为（9.26±2.1）μg/ml，r=+0.935 7。表1 蓖麻油甾醇成分及其相对质量百分数 （略） 　　 3 讨论 　　蜕膜在早孕的维持中具有重要的作用。胚胎在生长发育过程中，母体的营养物质主要通过蜕膜细胞直接进入胚胎。同时，蜕膜组织可能具有免疫屏障功能，且具有保护作用，既保护胎儿，也保护母体自身［11，12］。因此，一旦蜕膜发生变化，早孕的维持将受到严重的影响。 　　前人的研究表明，大多数食用植物油甾醇成分主要为菜籽甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇和菜油甾醇。在本实验中，蓖麻油甾醇晶体经GC-MS分析表明，蓖麻油甾醇主要由γ-谷甾醇（γ-Sitosterol）、豆甾醇（Stigmasterol）、岩藻甾醇（Fucosterol