薄层扫描法测定三子降糖颗粒中齐墩果酸含量.docVIP

　　薄层扫描法测定三子降糖颗粒中齐墩果酸含量 作者：徐世芳 马月光 姜丽霞 【摘要】 建立薄层扫描法测定三子降糖颗粒中齐墩果酸含量的方法。［方法］以硅胶G为薄层吸附剂，环己烷－丙酮－乙酸乙酯（4∶2∶1）为展开剂，10%硫酸乙醇为显色剂，在λs=530nm, λR=680nm波长处扫描，比较不同溶剂不同时间的提取效率。［结果］齐墩果酸在1.13μg ～ 9.04μg（n=5）范围内线性关系良好（r=0.9991）；仪器精密度、同板精密度、异板精密度的RSD分别为1.6%、2.6%、5.8%；重复性RSD为3.1%；平均回收率为99.1%，RSD为3.4%。3批样品齐墩果酸的含量为每袋125.1mg～135.8mg。［结论］方法专属性强、可靠，可用于该品的质量控制。 【关键词】 齐墩果酸;含量测定;薄层扫描法 三子降糖颗粒由三味中药经本院药物所结合 现代 科学 技术研制而成的复方制剂，齐墩果酸是其主要有效成分。有关齐墩果酸含量测定方法有薄层扫描法［1］、高效液相色谱法［2］、紫外光谱法［3］、气相色谱法［4］等。本文用氯仿提取，采用薄层扫描法测定三子降糖颗粒中齐墩果酸的含量。 　　 1 仪器与试药 CS930薄层扫描仪（日本岛津），PBQ1型薄层自动铺板器（重庆海洋化工厂），齐墩果酸对照品（ 中国 药品生物制品检定所）；三子降糖颗粒：由本所制剂室提供（试制品）；其它试剂均为分析纯。 　 　2 实验方法 　　2.1 薄层条件及扫描条件 　　薄层条件：薄层板为含0.5% 羧甲基纤维素钠的硅胶G板，以环己烷－丙酮－乙酸乙酯（4∶2∶1）为展开剂，饱和30h，展开、取出、晾干、喷以10%硫酸乙醇溶液，置90℃烘约10min至呈紫红色斑点，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。扫描条件：双波长反射法锯齿扫描，λs =530nm, λR =680nm，SX＝3。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 　　取齐墩果酸对照品适量，加氯仿－无水乙醇（1∶1）溶解，制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备 　　取本品约1.0g，精密称定，置索氏提取器中，用氯仿适量加热回流提取6h，提取液回收氯仿至干，残留物用氯仿－无水乙醇（1∶1）定容于25ml量瓶中，作为供试品溶液。 　　2.2.3 阴性对照溶液 　　按处方除去女贞子，然后照供试品溶液方法制备。 　　2.3 提取条件的选择 　　对乙醚和氯仿两种不同溶剂的索氏提取，及氯仿不同时间提取作了比较(同批样品)，结果见表1。表1 提取效率比较（略）。 从表可见，用乙醚或氯仿作溶剂，含量无明显差异，考虑到乙醚沸点低，易挥发，而且提取物中脂肪较多，因此选用氯仿作溶剂。氯仿不同回流时间提取，其含量基本一致，故选择6h。 　　2.4 线性关系及范围 　　精密吸取对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0uL，点于同一块薄层板上，依法展开，显色，扫描得峰面积积分值。以齐墩果酸峰面积对点样量（μg）作一回归处理，得回归方程及相关系数：Y =1150.0X 4.5 r=0.9991。结果表明齐墩果酸在1.13～9.04μg范围内呈良好线性关系。 　　2.5 阴性对照试验 　　依法点样，展开，显色，扫描。结果表明，薄层板显色后在齐墩果酸位置不出现斑点，扫描值为0，说明阴性对照样品中齐墩果酸的测 定无干扰。 　　2.6 稳定性试验 　　精密吸取供试品溶液点于薄层板上，依法展开，显色，于5h内，扫描测定10次，斑点峰面积RSD为1.6%，齐墩果酸斑点吸收度积分值在5h内稳定。 　　2.7 精密度试验 　　（1）仪器精密度：同一块薄层板上，对同一浓度对照品斑点连续多次扫描，峰面积RSD为1.6%(n=8)；（2）同板精密度：同一块薄层板上，对同一浓度对照品相同点样量的斑点进行扫描测定，峰面积RSD为2.6%(n=6)；（3）异板精密度： 对异板同一浓度对照品相同点样量的斑点进行扫描测定，峰面积RSD为5.8%(n=3)。 　　2.8 重复性试验 　　取同批样品称取6份，分别依法处理并测定，齐墩果酸含量的均值为132.6mg/袋,RSD为3.1%，示方法重复性良好。 　　2.9 加样回收率试验 　　精密称取已知含量的本品约0.5g，共6份，准确加入齐墩果酸对照品适量，按供试品溶液的制备方法操作，依法测定，结果平均回收率为99.1%，RSD为3.4%。 　 　3 实验结果 精密吸取供试品溶液3μl，对照品溶液1μl和3μl，分别交叉点于同一薄层板上，按所拟定的方法测定了3批样品的含量，结果见表2。表2 样品测定结果 (略) 　　 4 讨论 展开剂的选择是薄层色谱的重要环节。曾选用展开剂氯仿－甲醇（9.5∶0.