薄层扫描法测定前列通瘀胶囊中贝母素乙含量.docVIP

　　薄层扫描法测定前列通瘀胶囊中贝母素乙含量 【摘要】 目的：建立前列通瘀胶囊中贝母素乙的含量测定 方法 。方法：双波长薄层扫描法，硅胶GCMC薄层板，展开剂：苯丙酮醋酸乙酯氨水(2：3：4：0.2)，喷以改良碘化铋钾试液显色。结果：线性范围为0.52 μg-4.68 μg，平均回收率为97.8%，RSD=2.42%。结论：方法准确、可靠，为控制测定前列通瘀胶囊的质量提供了 科学 依据。 【关键词】 色谱法，薄层；前列通瘀胶囊；贝母素乙/分离提纯 　　前列通瘀胶囊为自主研制的中药复方胶囊剂，由浙贝母、薏苡仁等10味中药组成，具有清热利湿，散结祛瘀的功效［1］，贝母素乙为浙贝母中主要有效成分之一，为控制其内在质量，笔者以双波长薄层色谱法对成品中贝母素乙的含量进行了测定。 1 实验材料 　　CS9000型薄层扫描仪(日本岛津)；贝母素乙对照品(由 中国 药品生物制品检定所提供)；硅胶G(青岛海洋化工厂出品) ；前列通瘀胶囊(自制)其它试剂均为 分析 纯。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件［23］ 0.7% CMCNa硅胶G板(20 cm×20 cm)，105 ℃活化。精密吸取供试品溶液15 μL，对照品溶液3 μL和5 μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯丙酮醋酸乙酯氨水(2：3：4：0.2)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新配制的改良碘化铋钾试液至斑点显色清晰。 2.2 扫描条件 采用反射法锯齿扫描，配制贝母素乙对照品溶液，在370 nm-700 nm范围内扫描。结果表明，供试液与贝母素乙的光谱完全一致，并在500 nm波长处有最大吸收，在590 nm波长处几乎无吸收，故选择测定波长λs=500 nm，参比波长λR=590 nm。 2.3 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的贝母素乙对照品，加氯仿制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。 2.4 供试品溶液的制备 取本品20粒，倾出 内容 物，精密称定，取约5 g，精密称定，加入2.5 g硅藻土，拌匀，滴加浓氨试液2 mL，拌匀，置滤纸筒中，装于索氏提取器中，以氯仿回流提取6 h，回收氯仿液，残渣用氯仿溶解并定量转移至10 mL量瓶中，作为供试品溶液。 2.5 线形范围考察 准确吸取贝母素乙对照品溶液1.0　μL、3.0　μL、5.0　μL、7.0　μL、9.0　μL点于同一块硅胶G薄层板上，依法展开，晾干，显色后扫描，以对照品峰面积值为纵坐标，以点样量(μg)为横坐标进行线性回归，回归方程为：Y=726.6115X+0.1480(r=0.9997)，结果表明在0.52μg4.68 μg范围内贝母乙素的点样量与峰面积值呈良好的线性关系。 2.6 精密度试验 取同一供试品溶液于同一硅胶G薄层板及不同硅胶G薄层板上重复点样测定，结果板内贝母素乙含量RSD＝1.48% 板间贝母素乙含量RSD＝1.52%，表明精密度良好。 2.7 稳定性试验 　　取供试品溶液15 μL点于薄层板上，依法展开，显色后置薄层扫描仪内， 每隔0.5 h扫描1次， 结果RSD=1.78%(n=5)，说明贝母素乙在3.5　h内基本稳定。 2.8 空白实验 　　按处方比例，不加浙贝母，制得无浙贝母的空白制剂，按供试品溶液制备 方法 制备空白对照液，在薄层板上分别点上供试品溶液，对照品溶液及空白对照液，按色谱条件进行扫描，结果供试品色谱在对照品色谱相应的位置处有相同色谱峰，而空白对照品在此位置无干扰。 2.9 重复性试验 　　精密称取本品5 g，共取5份，按2.4项下方法制备，测定，结果该批样品中贝母乙素含量的RSD=2.19%，表明重复性良好。 2.10 加样回收率试验 　　精密称取已知含量的5份样品(批号200601)5 g，加入等倍量的标准品，按2.4项下方法制备，结果平均加样回收率为97.8%，RSD=2.42%，表明本方法回收率良好。 2.11 供试品测定 　　准确吸取供试品溶液15 μL，对照品溶液3 μL与5 μL，分别交叉点于薄层板上，依法展开，晾干显色后扫描，结果见表1。表1 样品中贝母素乙含量测定结果 　　3 小结 　　在供试品溶液的制备方法中，曾比较索氏回流提取、加热回流提取、超声处理等方法，结果以索氏回流提取法制得的供试品不仅含量高，且杂质干扰少，故被采用。用双波长薄层扫描法测定前列通瘀胶囊中贝母素乙的含量，从实验结果看其回收率高，稳定性好，精密度高，可以作为前列通瘀胶囊中贝母素乙的含量测定方法［4］。 【 参考