藤茶总黄酮对人胃癌SGC.docVIP

　　藤茶总黄酮对人胃癌SGC 作者：郑作文，郭成贤，毛健，谭为 【摘要】 　　目的探讨藤茶总黄酮的体外抗肿瘤作用。方法采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用。结果藤茶总黄酮能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长，MTT法IC50为20.71μg·ml-1；细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用；集落形成法，当药物浓度在9.90μg·ml-1以上时抑制率为100%，当药物浓度为6.60μg·ml-1时抑制率为69.80%，当药物浓度为4.40μg·ml-1时抑制率为30.23%。结论藤茶总黄酮对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。 【关键词】 藤茶总黄酮 抗肿瘤作用 SGC-7901 细胞株 　　Abstract：Objective To investigate the anti-tumor effect of Vine tea extract in vitro.MethodsThe groeasurement in the stomach cancer cell SGC-7901.ResultsVine tea extract could obviously inhibit the grol-1; Vine tea extract could obviously affect the tumor cell groedicine density l-1, the repressive ratio in cell colony assay edicine density l-1 ;the repressive ratio in cell colony assay edicine density l-1. ConclusionVine tea extract can inhibit the groor effect; SGC-7901； Cell line 　　藤茶Ampelopsis grossedentata(Hand-Mazz)I-1640干粉(美国Gibco公司产品)；新生牛血清（杭州四季青公司产品，批号031101）；四甲基二氮唑蓝（北京拜尔迪生物公司分装，Amresco 0793）；二甲基亚砜（博大泰克公司产品）；0.25%胰蛋白酶(美国Hyclone Lab公司产品)；注射用生理盐水(徐州莱恩药业公司产品，批号051122)。 　　1.4 仪器 SUNRISE自动酶标仪(奥地利TECAN公司产品)；311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品)；DLF560型超净工作台(荷兰clear Air Techniek bv公司产品)；细胞培养瓶(加拿大 BIOFIL公司产品)；96孔板(上海Sunub科技 发展 公司产品)；倒置显微镜(广西梧州光学仪器厂产品)；微量移液器(法国Pipetman公司产品)；十万分之一 电子 天平(德国赛多利斯产品)。 　　1.5 培养液及试剂的配制 RPMI-1640不完全培养液，不加血清的RPMI-1640培养液;RPMI-1640完全培养液，10%新生牛血清＋RPMI-1640不完全培养液。 　　 2 方法与结果 　　2.1 SGC-7901细胞培养 在长满SGC-7901细胞的培养瓶内加0.25%胰酶，37℃消化3～4 min，加培养液吹打，1∶3传代，3～5 d长满。消化后计数，配制成10×104/ml细胞悬液，置37℃，5%CO2培养箱中培养备用。 　　2.2 MTT法测定［8，9］将SGC-7901细胞（1×105/ml）接种到96孔细胞培养板上，每孔190 μl，并设空白对照组（只加RPMI1640完全培养液,不加细胞）。藤茶总黄酮8个剂量组分别加入不同浓度的藤茶总黄酮10 μl/孔（终浓度分别为75.00，50.00，33.37，22.26，14.84，9.90，6.60，4.40 μg·ml-1），每个浓度均设4个复孔，同时设细胞对照孔（只加细胞和RPMI1640完全培养液，不加药物）。在37℃，5%CO2培养箱中培养48 h，加入MTT（5 mg·ml-1）10 μl继续培养4 h，弃上清，用RPMI-1640不完全培养液洗板2次，加入DMSO150 μl，振荡10 min,以酶标仪在550 nm处测各孔吸光度值（OD）， 计算 抑制率，用对数回归方程求出半数杀伤浓度（IC50）。肿瘤细胞生长抑制率按下式计算。 　　肿瘤细胞生长抑制率（%）＝（1－实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100% 　　2.3 生长曲线法测定［8，9］取对数生长期的细胞，用10%新生牛血清的RPMI1640培养液配成1×104 /ml的细胞悬液，接种于96孔培