超微粉碎对茯苓多糖溶出特性的影响.docVIP

　　超微粉碎对茯苓多糖溶出特性的影响 作者：桂卉，梁少瑜，雷志钧，蔡光先 【摘要】 目的探讨超微粉碎是否会提高茯苓多糖的溶出度。方法以硫酸-苯酚法、紫外分光光度法测定茯苓多糖的含量，采用浆法测定溶出度，用威布尔模型进行拟合，对溶出参数T50(药物溶出50％所需时间)、Td(药物溶出63．2％所需时间)、m(溶出曲线斜率)进行统计分析。结果不同粒径茯苓药粉的茯苓多糖溶出度参数间差异有统计学意义(Plt;0.05)。超微粉与常规细粉的溶出度参数之间存在极显著性(Plt;0.01)。结论超微粉碎可提高茯苓药材的茯苓多糖溶出量和溶出速度。 【关键词】 茯苓多糖； 超微粉碎； 溶出度； 浆法 茯苓为多孔菌科真菌的干燥菌核，性味甘、淡、平,归心、肺、脾、肾经，具有祛湿利水、健脾和胃、宁心安神等作用［1］，为常用中药, 主要含有茯苓多糖(约占干重93 %)、三萜类化合物乙酞茯苓酸、茯苓酸，此外，还含树胶、甲壳质、蛋白质、脂肪、甾醇、卵磷脂、组氨酸、胆碱和锂盐等。茯苓多糖为茯苓的主要药理活性成分，茯苓多糖通过增强免疫功能，激活免疫监视系统，抑制肿瘤细胞DNA、RNA合成等机制，发挥抗肿瘤作用［2］，茯苓多糖还具有抗衰老、抗氧化等作用。有研究表明，水提只能提取少量的茯苓多糖，以粉末入药为佳。超微粉碎技术是指借助于特殊的机械力、射流能力或物理、化学作用，使普通物质超微化。它是20世纪80年代迅速 发展 起来的一项跨学科、跨行业的高新技术，已被广泛应用于化工、医药、食品、农药、化妆品、染料、涂料、 电子 、航空航天等许多领域。用超微粉碎技术对中药材进行处理后，细胞破壁率大于95％，有效成分溶出速度加快，溶出量增加。本实验对茯苓超微粉与茯苓细粉中茯苓多糖的溶出度进行比较研究，为茯苓超微粉用于临床，提高茯苓的临床疗效提供实验依据，为进一步研究打下基础。 　 　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　激光粒度测定仪（T6BI型翻滚式贝利粉碎机）；中草药粉碎机（Fl加水至200 ml置棕色瓶内，放冰箱备用。 　　1.4 对照品溶液的配制 　　精密称取干燥恒重的葡萄糖标准品14.5 mg加蒸馏水溶解并定容至250 ml 容量瓶中，即得。 　 　2 方法与结果 　　2.1 茯苓超微粉的制备 　　取市购茯苓药材1 000 g，40～50℃干燥，分为4份。两份用普通粉碎机分别粉碎成100目和200目的常规细粉，另两份用贝利粉碎机分别粉碎成300目和400目的超微粉。 　　2.2 茯苓多糖含量测定的实验条件 　　以硫酸-苯酚法、紫外分光光度法进行测定，通过预试确定最佳反应条件为：加入5%苯酚试剂1.2 ml，浓硫酸4.5 ml，室温下反应并放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 标准曲线的绘制 　　精密吸取葡萄糖对照品溶液0.0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8,1.0 ml分别置于20 ml试管中，分别加蒸馏水至1.0 ml，加入5％苯酚溶液1.2 ml，混匀后加入浓硫酸4.5 ml，充分混合，室温放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。 求得标准曲线的回归方程：Y=9.320 7 X-0.005（X：对照品含量；Y：吸光度）， 相关系数r=0.999 6（n=7），表明在0.058～0.58 mg范围内葡萄糖含量与吸光度之间有良好的线性关系。 　　2.3.2 精密度实验 　　精密吸取葡萄糖对照品溶液1.0 ml 5份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=0.96%（n=5），表明仪器精密度良好。 　　2.3.3 重复性实验 　　精密吸取供试品溶液1.0 ml 6份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=1.02%( n=6)，表明重复性良好。 　　2.3.4 加样回收率实验 　　精密称取已知含量的样品，准确加入对照品一定量，依法测定， 计算 回收率。结果见表1。表1 回收率实验（略） 　　2.4 100％溶出量的测定 　　分别精密称取适量的不同粒径的茯苓药粉，分别置于900 ml溶出介质中，(37±0.5)℃水浴，转速为60 r·min-1，6 h后，取样2 ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液在上述色谱条件下测定不同粒径的茯苓药粉的茯苓多糖的含量，作为不同粒径茯苓药粉的100％溶出时茯苓多糖的溶出量。 　　2.5 溶出度测定 　　为了使样品在溶剂中具有良好溶出曲线，通过预试确定：转速60 r·min-1，水浴温度(37±0.5)℃，溶出介质 900 ml人工胃液，分别于 2，4，6，8，10，15，20，25，30，45，60 min取样2ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，同时补充同温度同体积的溶出介