轮叶党参提取物对脑血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影响.docVIP

　　轮叶党参提取物对脑血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影响 作者：吕立勋 韩刚 董月 原海忠 王成强 【摘要】 目的 考察轮叶党参乙醇提取物对脑血栓栓塞大鼠血浆溶血磷脂酸（LPA）和磷脂酸（PA）水平的影响。方法 采用颈内动脉直接插管注入凝血酶建立大鼠脑血栓栓塞模型。SD大鼠40只，随机分为正常对照组、模型组、假手术组、轮叶党参提取物低、中剂量组。除正常对照组外，其余4组大鼠建立脑血栓栓塞模型。轮叶党参提取物组预先14 d灌胃给予轮叶党参乙醇提取物，观察轮叶党参乙醇提取物对大鼠脑血栓栓塞后LPA和PA水平的影响。结果 与正常对照组比较，模型组大鼠血浆溶血LPA和PA水平升高（Plt;0.05）；预防性给予轮叶党参乙醇提取物可明显降低血浆LPA和PA水平（Plt;0.05）。结论 轮叶党参乙醇提取物可降低脑血栓栓塞大鼠血浆LPA和PA水平。 【关键词】 轮叶党参；溶血磷脂酸；磷脂酸；脑血栓栓塞 　轮叶党参(Codonopsis lanceolata)属桔梗科党参属多年生草本植物，分布于我国东北、华南、西南等地〔1〕。轮叶党参含多种维生素、皂苷、多糖、黄酮类化合物、齐墩果酸及挥发油，具有抑制肿瘤生长、抗疲劳、降血脂、抗氧化及清除自由基等作用〔2～4〕，对人血小板有抗凝集作用〔5〕，但其抗血栓研究鲜见报道。磷脂代谢的中间产物溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid，LPA)和磷脂酸(phosphatidic acid,PA),在(心)脑卒中的发生过程中可能起重要作用。血浆LPA的增高标志着血小板活化,而PA水平的增高则反映脑缺血缺氧程度,与氧自由基的过度形成有关。当血浆中LPA明显增高时，凝血过程开始，预示有形成血栓的可能〔6〕。LPA一般在体内含量较低，主要在血小板被激活时释放，刺激血小板聚集和平滑肌收缩，促进血管内皮增生，在凝血和血栓形成过程中起着重要的作用〔7〕。血小板活化在脑梗死的发生 发展 、 治疗 和预后中有重要意义。本文采用凝血酶凝血的方法建立大鼠脑血栓栓塞模型，研究轮叶党参乙醇提取物对脑血栓栓塞大鼠LPA和PA水平的影响。 　 　1 材料与方法 　　1.1 仪器 　　TU1810型紫外可见分光光度计（北京普析通用公司）；RE52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；KDC1042低速离心机（科大创新股份有限公司）；SK1型快速混匀器（江苏医疗仪器厂）。 　　1.2 试剂 　　凝血酶（安徽桑尼生物药业有限公司，规格500 U）；LPA测定用套装试剂盒（北京泰福仕科技开发有限公司）；轮叶党参（产于长白山）由延边大学医学院提供；其余试剂均为分析纯。 　　1.3 动物 　　健康清洁级SD大鼠40只，雌雄各半，体重240～260 g，购于北京实验动物有限公司，动物许可证号： SCXK（京 　　1.4 方法 　　1.4.1 轮叶党参乙醇提取物的制备 　　将切碎的轮叶党参根茎浸入70%乙醇中，于70℃水浴中浸泡，并不断搅拌4 h，过滤得到上清液，将滤渣重复操作一次，合并上清液置于旋转蒸发仪中于70℃减压浓缩，干燥后得到轮叶党参乙醇提取物，备用。 　　1.4.2 动物分组与给药 　　40只大鼠随机分为，正常对照组、模型组、假手术组、轮叶党参乙醇提取物低、中剂量组，每组8只。除正常对照组外，其余4组大鼠建立脑血栓栓塞模型。正常对照组、假手术组、模型组术后4 h断头处死取血；轮叶党参乙醇提取物低(0.5 g/kg)、中(1 g/kg)剂量组术前每天灌胃给予轮叶党参乙醇提取物，连续给药14 d，其余过程同模型组。 　　1.4.3 大鼠脑血栓栓塞模型的建立〔8〕 　　术前大鼠禁食12 h，用1%戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉后，仰卧位固定于手术台上。颈正中部纵向切开皮肤，切口长约2 cm，游离出右侧颈总动脉，从颈总动脉分叉处向上分离颈外动脉和颈内动脉。结扎颈外动脉，然后向颅底方向分离颈内动脉，在颅底处分离出翼腭动脉，并结扎其根部，仅保留颈内动脉入颅底主干；结扎颈总动脉，暂用2只微型动脉夹间隔一定距离夹闭颈内动脉，在近心端颈总动脉处用眼科剪剪一小口，插入导管(内已抽好血栓诱导剂凝血酶10 U加生理盐水0.05 ml)固定后，移去近导管端血管夹，少量血液流入导管头端，放置约10 min形成一小血栓，然后移去另一只血管夹，缓慢将此血栓和凝血酶注入颈内动脉后，拔出导管,并将颈总动脉切口处结扎，缝合切口；术后单笼饲养。假手术组手术操作过程同上，只是不注入血栓和凝血酶，而注入等量生理盐水。 　　1.4.4 血浆LPA和PA测定 　　取全血约4 ml，置于涂有肝素抗凝剂的离心管中。4 000 r/min离心10 min，准确吸取上清1 ml，抽提磷脂成分。加入显色剂于9