2016-2017学年高中生物课件：1.1工具酶的发现和基因工程的诞生(浙科版选修三)要点.ppt

* * 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 基因工程又叫DNA重组技术，是按人们愿望，进行严格设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造更符合人们需要的新的生物类型与产品。 基因工程概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 实质 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的诞生 时间：20世纪70年代 理论基础： DNA双螺旋结构 遗传信息传递方式（中心法则） 技术基础： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒载体 基因工程的基本内容 基因操作 基本步骤 基因操作 的工具 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 2.目的基因与运载体结合 4.目的基因的检测和表达 3.将目的基因导入受体细胞 1.提取目的基因 一　基因操作的工具 　　基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具： １、基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。 指一类酶，非一种酶。 1、限制性内切酶 （3）.举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 （1）作用部位：磷酸二酯键 （2）特点：专一性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 （4）来源：主要从原核生物中分离 原因：限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，对自己DNA无害，保护细胞原有遗传信息，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 而真核生物一般有其他保护措施。 （5）作用结果：形成DNA片段末端 ①平末端：平切（相同部位） ②黏性末端：错位切（不同部位） 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。 ２、基因的针线──DNA连接酶 （1）连接的部位：DNA双链片段间的 磷酸二酯键，不是氢键。 （2）常用种类： ①E.coliDNA连接酶： 来源：大肠杆菌 作用：连接黏性末端 ②T4DNA连接酶： 来源：T4噬菌体 作用：连接黏性末端、 平末端 （3）DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 DNA聚合酶 DNA连接酶 化学本质 作用部位 模板 蛋白质 蛋白质 磷酸二酯键 （单个脱氧核苷酸+片段） 磷酸二酯键 （DNA双链片段+ DNA双链片段） 需要（DNA一条链） 不需要 3、基因的运输工具——运载体 3.种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 1.作用：将外源基因送入受体细胞。 2.条件： 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 具有一个至多个限制酶切点，使外源基因插入其中。 具有某些标记基因，以便进行筛选。如抗菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 对受体细胞无害，不影响其正常活动。 最常用的运载体------质粒