Toll样受体7及9在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞内的表达及意义.pdfVIP

上海交通大学硕士论文 材料与方法 1.研究对象 1.1 SLE组 所有研究患者均为2009年6月至2010年6月上海市第六人民医院门诊或住院 病人，共40例，其中，男3例，女37例，年龄16∼60岁，平均34.96岁。所有患者 均符合美国风湿协会1997年修订的分类标准, 其中30例为活动期病人，包括14 例未用激素治疗的初发病人，16例停用激素复发病人；稳定期病人10例。40例 患者中有31例出现肾脏损害表现，其中23例行肾脏活组织病理检查。疾病活动 程度采用SLE疾病活动指数( SLEDAI) 评分法[32] ，≥10 分为活动期， 10 分 为缓解期。排除合并感染、肿瘤及其它自身免疫性疾病的患者。 相关诊断与评分标准 （1） SLE诊断标准[33] ： 参照美国风湿病学会（ACR ）1997年推荐的SLE分类诊断标准（见附表1）， 满足4项或以上并排除其他疾病者可诊断。 （2 ） SLEDAI评分[32] 根据患者的临床症状和实验室检查结果，以SLEDAI评分标准量化评分（见 附表2 ）：其中，癫痫发作、精神症状、器质性脑病、视觉障碍、颅神经病变、 狼疮性头痛、脑血管意外、血管炎每项各8分；关节炎、肌炎、管型尿、血尿、 蛋白尿、脓尿每项各4分；新发皮疹、脱发、粘膜溃疡、胸膜炎、心包炎、低补 体血症、抗ds-DNA抗体滴度增高每项各2分；发热、白细胞减少、血小板减少各 1分。 SLEDAI 积分对 SLE 病情的判断：0~4 分，基本无活动；5~9 分，轻度活动； 10-~14 分，中度活动；≥15 分，重度活动。 （3 ） LN诊断标准与分型： LN诊断标准： 满足以下三项者诊断为LN ：符合SLE诊断标准；临床肾损害表现，尿蛋白 - 18 - 上海交通大学硕士论文 0.5g/24h ，或+ ，管型尿，血尿，和/或肾功能不全；排除其他原因引起的尿和肾 功能异常。 LN病理分型： 参照 2003 年 ISN/RPS 制定的病理分型标准[34] （见附表3 ），LN 病理分为 以下类型：Ⅰ型：轻微病变性 LN ；Ⅱ型：系膜增殖性 LN ；Ⅲ型：局灶增殖性 LN ；Ⅳ型：弥漫增殖性LN ；Ⅴ型：膜性LN ；Ⅵ型：硬化性LN 。 LN 临床分型： 轻度损害型:轻到中度蛋白尿，伴血尿、管型尿，可伴水肿、高血压；肾病 综合征型：大量蛋白尿 (3.5g/d) ，低蛋白血症 (30g/L) ，可有高脂血症，多伴 有高血压、血尿与肾功能不全；肾功能不全型:主要表现为血 BUN 、Cr 持续升高， 可伴有贫血、高血压、水肿。 [35] （5 ） 肾脏损伤指数 ： 按照尿常规及24h尿蛋白指标累及计算： 血尿4分、脓尿4分、管型尿4分、 蛋白尿4分；分值最小0分，最高16分。 1.2 正常对照组 健康对照组为本院年龄和性别相仿的健康体检者，共30例，其中女性26例， 男性4例，平均年龄30.56岁。抽血前1月内无感染病史，排除其他自身免疫性疾 病。所有受试对象均知情同意。 2. 实验材料 主要仪器设备 低温高速离心机 Eppendorf ，USA 电热恒温水槽 上海精宏实验设备有限公司 Bio-Rad梯度PCR仪 Bio-Tek公司，USA Bio-Rad 电泳仪 Bio-Tek公司，USA 紫外分光光度计Unico UV-2000 尤尼柯（上海）仪器有限公司 凝胶成像系统GIS-2008 上海天能科技有限公司 ABI Prism 7900 测序仪