检测尿微量蛋白和Ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义.docVIP

　　检测尿微量蛋白和Ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义 ［摘要］ 目的：探讨尿标本中视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、微量白蛋白(mALB)及Ⅳ型胶原(ⅣC)检测在糖尿病肾病早期诊断中的作用。 方法 ：用ELISA法检测尿中RBP、TRF及ⅣC，免疫比浊法检测尿微量白蛋白 (mALB)，酶偶联法测定尿肌酐。结果：正常对照组中尿 rBP/Cr、TRF/Cr及ⅣC的含量分别为(2.12±0.95) mg/mmol,(1.81± 0.52) mg/mmol,(44.68±17.2) ng/ml。在糖尿病无肾病组中，其mALB的含量与正常对照组相近(P＞0.05)，而RBP、TRF及 ⅣC的含量与正常对照组相比差异具有显著性(P＜0.05)。在糖尿病的初期肾病组和临床肾病组，mALB、RBP/Cr、 tRF/C的及ⅣC的含量均明显高于正常对照组(P＜0.01)。结论：联合检测尿RBP、TRF及ⅣC是诊断糖尿病肾病早期损伤灵敏、可靠的实验室指标。 　　［关键词］ 糖尿病肾病；视黄醇结合蛋白；转铁蛋白；Ⅳ型胶原 　　糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)为糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的一种严重慢性并发症，在糖尿患者的死亡原因中占有较大比例，故早期诊断对DM的防治和预后具有重要意义。在早期肾活检发现组织学改变时，临床上常无症状，尿常规与肾功能检查均可正常。 目前 肾病的实验室诊断多以尿微量蛋白、肌酐等作为主要诊断指标，这些指标也难以发现肾脏的早期损害。本资料联合检测尿中视黄醇结合蛋白(Rbinding protEin,RBP)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)等微量蛋白和Ⅳ型胶原(Type Ⅳ collagen,ⅣC)，以期早期发现肾脏损害，进而有助于筛选及检出早期DN。 　　1　材料与方法 　　1.1　 研究 对象 　　1.1.1　正常对照组　50例，为健康体检人群，男28例，女22例，平均年龄(35.2±10.8)岁。 　　1.1.2　糖尿病组　按患者尿微量白蛋白排泄率(Urinaryalbumin excretionrate,UAER)将其分为3组。DM1组：UAER＜30 mg/24 h，为无肾病组共15例。DM2组：UAER在30 mm/24 h～300 mg/24 h，为初期肾病组共 17例。DM3组：UAER＞300 mg/24 h，为临床肾病组共18例。 　　1.2　方法 　　1.2.1　尿微量白蛋白(mALB)肌酐测定　免疫比浊法测定mALB,试剂由伊利康生物制品公司提供。同时用Beckman cX7全自动生化 分析 仪测量尿肌酐，试剂由美国贝克曼公司提供。结果以 mALB/Cr表示，单位为mg/mmol。 　　1.2.2　尿RBP、TRF测定　留取除晨尿外的尿液，离心收集上清液，根据磺基水杨酸尿蛋白定量结果进行不同倍数的稀释。采用ELISA法，按福建太阳生物技术公司提供的试剂盒说明书进行测定，结果分别以RBP/Cr、TRF/Cr表示，单位为mg/mmol。 　　1.2.3　尿ⅣC测定　由于ⅣC在尿中浓度较低，需对标本进行浓缩。其操作为在离心后的尿液标本中缓慢 依次加入SigmaChemical　CO，出品的10 g/L牛γ球蛋白0.8 ml和5 ml的450 g/L的PEG4000，在4°C孵育5 min后，于冷冻离心机离心，弃上清液，再用生理盐水充分溶解至1 ml，即得到10倍浓缩尿标本。将浓缩后的尿标本采用ELISA法，按 中国 科学 院上海细胞生物研究所施高生物技术实业有限公司生产的ⅣC测定试剂盒说明书进行测定，单位为ng/ml。 　　1.3　数据统计　实验数据以±s表示，以单因素方差分析进行数据处理，部分指标进行相关分析，P＜0.05为差异有显著性。 　　2　结果 　　正常对照组与DM各组间尿中mALB、RBP、TRF及ⅣC含量的比较见表1。在正常对照组、糖尿病无肾病组、初期肾病组及临床肾病组中其尿中的mALB、RBP、TRF及ⅣC含量均呈递增趋势。其中在无肾病组(DM1)其mALB含量与正常对照组差异无显著性(P＞0.05)，而RBP、TRF及ⅣC含量均已高于正常对照组(P＜0.05)。在初期肾病组(DM2)尿中mALB、RBP、TRF及ⅣC4种微量蛋白的含量与正常对照组相比均有显著升高(P＜0.01)，且高于无肾病组(P＜0.05)。在临床肾病组(DM3)尿中上述4种微量蛋白的含量与对照组、无肾病组及初期肾病组相比，均呈显著性升高，其中增加的倍数以mALB为最。 　　表1　正常对照组与糖尿病各组间尿微蛋白检测结果比较（略） 　　注：与正常组相比*P＜0.05,**P＜0.01 　　3　讨论