高效液相色谱法幻灯片1.pptVIP

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC) 第一节 概述 高压：150~350×105Pa 高速：流动相流速可达1~10mL·min-1， 1小时内可分离20种氨基酸； 高效：气相色谱法柱效约为2000塔板/米；高效液相色谱法柱效可达3万塔板/米以上； 高灵敏度：紫外检测器最小检测量10-9g；荧光检测器灵敏度10-11g，微升数量级进样 。 HPLC与经典LC区别 经典LC：一种分离手段 柱内径1~3cm,固定相粒径100μm 且不均匀； 常压输送流动相 ; 柱效低（H↑，n↓）； 分析周期长;无法在线检测 HPLC：分离和分析 柱内径2~6mm，固定相粒径10μm（球形，匀浆装柱）； 高压输送流动相; 柱效高（H↓，n↑）； 分析时间大大缩短;可以在线检测 气相色谱法与液相色谱法 分析对象：气相色谱只限于分析气体和沸点低的化合物或挥发性的衍生物；在液相色谱中只要被分析的物质在流动相中有一定的溶解度即可。 流动相作用：GC中只起运载作用；LC中与组分有一定亲和力，可通过改变流动相提高分离的选择性，且可选的流动相多。 样品回收：LC可将样品很容易地回收，且可用来提纯和制备物质。GC将样品直接排空。 灵敏度：LC不及GC。 第二节 高效液相色谱法