重组人干扰素_2b表达与分离纯化研究_姚文兵.pdfVIP

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2017-05-09 发布于浙江
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重组人干扰素_2b表达与分离纯化研究_姚文兵.pdf

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重组人干扰素_2b表达与分离纯化研究_姚文兵

　　　　　　　 152 Journal of China Pharmaceutical University 　2001, 32(2):152 ～ 154 α2b ＊姚文兵 , 许　敏, 吴梧桐, 沈子龙 (, 210009) 　　　从湿菌体中分离纯化重组人干扰素α2b。　采用(NH )SO 盐析-H PO 处理-CM 2 离 4 2 4 4 子交换层析-DE52 离子交换层析-Sephadex G100 凝胶层析等非亲和层析纯化法。　回收率约为 0%, 8 HPLC 检验纯度达96%, 每毫克蛋白比活力达 1.66×10 IU。　分离纯化系统令人满意, 回收率较高。　重组人干扰素α2b;分离;纯化;鉴定 :Q50 　　:A　　:1000-5048(2001)02-0152-20 　　 );(IPTG)(BBI , 、 );(Sigma ); 。α 。 , , 2　、。α2b , 2.1　种子液制备。rHuIFNα2b , LB ( 10 g 、5 g rHuIFNα2b , 、5 g ), 7 ℃200 r/min OD 1.0。。 600 2.2　发酵培养 1　 16L: 160 g, 80 g, 1.1　rHuIFNα2b 工程菌 Na2HPO4 ·12H2O 240 g, KH2PO4 2 g, NH4Cl 12.8 g, 。 NaCl 64 g,MgSO4 .2 g, CaCl2 0.16g , 1.2 　仪器 121 ℃20 min 7 ℃, BS-100A ( 9.6%1L, 0.8 g, );882 A-( 800 ml , 100%。7 );TH-100 (); h, 。 HP1090 ();( 2.　总蛋白含量的测定 Pharmacia )。 [1] , Bradford 1.　试剂。 (CM 2)、 2.4　抗病毒活性测定 (DEAE-52)、Sephadex G-100 (