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金纳米探针检测DNA序列

金纳米探针检测DNA 序列 2016-06-21 13:34 来源:内江洛伯尔材料科技有限公司作者:研发部 金电极放大电化学检测示意图 DNA 作为一种生命基本遗传物质,现在已经广泛应用于生物传感中,电化学的DNA 生 物传感器是尤其有发展前途的传感器. 文献报道了寡核苷酸上连接有纳米金属微粒 能够提高方法本身的灵敏度和序列的选择性,纳米粒子嵌入的DNA 生物传感器研究 已经日益深入. 二茂铁具有特殊的夹心结构,这种结构使其具备了芳香性、氧化还原 可逆性以及稳定、低毒等特性,它的氧化还原电化学活性被广泛应用于DNA 传感体系 中,因此,近年来二茂铁及其衍生物仍是化学家研究的热点. 电化学方法与传统方法(例如荧光、化学发光和生物素标记、放射性同位素标记) 相比,具有仪器简单、价格低廉、测定快速准确和方法灵敏度高,无需复杂仪器及操 作等优点,并且避免了放射性污染等弊端,无毒害作用. 有关DNA 杂交的电化学测定 一般基于以下条件:靶点DNA 或者核苷酸上的氧化还原性标记物的电化学反应;双螺 旋蛋白酶等结构上的标记物产生的电活性产物;指示剂分子如金属阳离子配合物等. 不过,基于纳米金属微粒的DNA 双链结构的直接、放大的伏安检测,文献报道很少或 者不够深入. 北京师范大学化学系胡劲波等人用冠以大量二茂铁的纳米金微粒/抗生蛋白链菌 素结合物为标记物,将其标记于生物素修饰的寡聚核苷酸片段上,制成了具有电化学 活性和纳米金放大作用的DNA 电化学生物传感器. 首先采用巯基DNA 和巯基烷烃混 合自组装膜制备了金修饰电极,将探针DNA 分子固定在了电极表面,运用杂交原则结 合靶点分子在电极表面形成了双螺旋的DNA 链,然后借助抗生蛋白链菌素和生物素 之间的强亲和作用,引入了功能化的纳米金. 通过伏安法测定了修饰在纳米金上的 二茂铁的氧化还原电流,可以识别和测定溶液中互补的靶点DNA , 172mer 靶点DNA 的浓度在0.001~10nmol/L 范围内有线性关系,检测限可达0.75×10-12mol/L.

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