金纳米粒子的细胞毒性(三)：胞吞作用.pdfVIP

金纳米粒子的细胞毒性(三)：胞吞作用 2016-08-16 12:54 来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部 纳米颗粒的大小及其表面配体在细胞胞吞过程 中的作用 实际上在研究 AuNPs 和细胞的作用时，胞吞作用(endocytosis) ，即颗粒进入细胞的作用 过程，是第一位要研究的现象。大体分来，胞吞作用可分为吞噬作用(phagocytosis)、胞饮作用 (pinocytosis)以及受体介导胞吞作用(receptor-mediated endocytosis ，RME)。吞噬作用是以 大的囊泡形式(常称为液泡)内吞直径达几微米的固体复合物、微生物以及细胞碎片等的被噬取过 程。胞饮作用是指以小的囊泡形式将细胞周围的微滴状液体(直径一般小于 1 微米，常含有离子 或小分子)吞入细胞内的过程。胞饮作用丌具有明显的与一性。这种胞吞常常造成细胞的坏死而 形成坏死细胞(necrotic cells)。受体介导的胞吞作用是指被内吞物(称为配基 ) 不细胞表面的与 一性受体相结合，并随机引发细胞膜的内陷，形成的囊泡将配基裹入并输入到细胞内的过程，它 是一种与一性很强的胞吞作用。AuNPs 的内吞属于受体介导的胞吞作用 ，具有很强的与一选 择性。在研究纳米颗粒和细胞的相互作用过程中，RME 是第一位要考虑的机理，一个外来的配 基结合细胞表面上的受体而进入细胞。细胞表面上受体的浓度以及受体和配基的作用力决定了胞 吞的强度。温度对 RME 也有重要影响，例如在低温时金纳米颗粒将丌进入细胞，而是贴在细胞 膜上。 在研究 AuNPs 的胞吞作用时，上面提到的两个因素，即颗粒大小和吸附在颗粒表面的配 基性质具有极为重要的意义，后者能和细胞表面上的蛋白受体相结合从而进入细胞。当研究 AuNPs 的尺寸因子和表面改性的影响时，首先要观察的是AuNPs 是否进入了细胞，AuNPs 在 细胞内的分布以及能否形成聚集体等问题。 Huang 等，Oh 等和 De 等利用电子显微镜研究了 AuNPs 在进入细胞后在各个部位的分 布， 并作了十分细致的工作。例如 Huang 等利用静脉注射研究了 2 ，6 和 15 nm AuNPs 在小 鼠的肿瘤细胞内的分布，所用的是巯丙酰甘氨酸(Tiopronin)保护的 AuNPs。他们发现 2 nm 和 6 nm 的AuNPs 能分布在癌细胞的胞质和细胞核中，而 15 nm AuNPs 只在胞质中存在，而丏 形成了聚集体。Chithrani 等用电镜研究发现包覆有柠檬酸的AuNPs 是通过 RMS机理进入 Hela 细胞的，并证明了当 AuNPs 颗粒的直径等于 50 nm 时，AuNPs 进入 Hela 细胞的数目达到最 大值，在此之后，进入细胞的数目变少。 Jiang 等在研究 AuNPs 对细胞的作用时，利用 5,10 和 25 nm 由聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 保护的 AuNPs ，以及AuNPs 的自由聚集体和在固体表面上固定的聚集体对 Hela 细胞的活性 进行了研究，证明了粒径在 50 nm 以下的AuNPs 能被细胞胞吞，并对细胞产生毒性的事实。 同时发现，其中被胞吞的大粒径AuNPs 比小颗粒易于形成聚集体，从而具有更大的毒性。但当 颗粒太大(或者在细胞外形成聚集体)无法进入细胞时，反而会促进细胞的生长。