隐丹参酮对K562细胞凋亡的影响及其机制_葛宇清.pdfVIP

·3188 · 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 22 期 2013 年 11 月 隐丹参酮对 K562 细胞凋亡的影响及其机制 1 2 2 2 1* 葛宇清 ，杨 波 ，程汝滨 ，黄 真 ，陈 喆 1. 浙江中医药大学第一临床医学院，浙江 杭州 310006 2. 浙江中医药大学药学院，浙江 杭州 310053 摘 要：目的 探讨隐丹参酮诱导人慢性髓系白血病 K562 细胞凋亡的作用及其线粒体途径相关机制。方法 MTT 法检测 隐丹参酮对细胞增殖的抑制作用；Annexin V-FITC/PI 双标记流式细胞术检测丹参酮对细胞凋亡的影响，DAPI 染色法观察细 胞形态的变化；Western blotting 检测丹参酮对细胞凋亡相关蛋白 Caspase-3、Caspase-9、PARP 、Bax 、Bcl-2 和细胞色素 C （Cyt C ）表达的影响，线粒体膜电位检测试剂盒检测丹参酮对线粒体膜电位的影响；检测线粒体膜通透性转运孔（PTP ）抑制剂 环孢霉素 A 和 caspase 抑制剂 z-VAD-fmk 对隐丹参酮药效的影响。结果 隐丹参酮对K562 细胞的生长有显著抑制作用，可 引起细胞形态发生明显改变，诱导细胞发生凋亡，提高蛋白 Bax/Bcl-2 的比例，降低线粒体膜电位，促进Cyt C 从线粒体释 放到胞浆，增强促凋亡蛋白 Caspase-3、Caspase-9 和 PARP 的活性。环孢霉素A 和 cz-VAD-fmk 均能减弱隐丹参酮抑制细胞 增殖和诱导细胞凋亡的作用。结论 隐丹参酮可显著诱导K562 细胞凋亡，其机制与线粒体凋亡途径密切相关。 关键词：隐丹参酮；K562 细胞；细胞增殖；细胞凋亡；线粒体途径 中图分类号：R979.19 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)22 - 3188 - 07 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.22.017 Effect of cryptotanshinone on apoptosis in K562 cell and its mechanism 1 2 2 2 1 GE Yu-qing , YANG Bo , CHENG Ru-bin , HUANG Zhen , CHEN Zhe 1. The First Affiliated Hospital, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310006, China 2. College of Pharmaceutical Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China Abstract: Objective To investigate the apoptosis inducing effects of cryptotanshinone (CPT) in human chronic myeloid leukemia K562 cells and its molecular mechanisms. Methods K562 cells were firstly treated with CPT at different concentration. Then, the inhibitory effect of CPT was detected by MTT assay; morphological changes of cells were observed by inverted microscope; cell apoptosis was detected by Annexin V-FITC/PI staining. Western blotting was carried out to determine the expression of apoptosis-related prote