第一章 酶工程绪论.pptVIP

酶 工 程 第一节 酶的基本概念及催化特性 　　绝对专一性：酶只作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物 。 　　如： 第四节 酶的生产方法 酶的生产： 通过人工操作而获得所需的酶的技术过程。 提取分离法 生物合成法 化学合成法 1、提取分离法（最早采用、沿用至今） 采用各种技术，直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来，再进行分离纯化的过程。 （1）提取法 （2）分离法 2、生物合成法（主要方法） 利用动物中细胞或微生物细胞的生命活动获得所需酶的过程。 3、化学合成法（实验室阶段） 化学合成法是20世纪60年代末出现的一种生产酶的技术。1969年，美国科学家首次采用化学合成的方法获得了含有124个氨基酸的核糖核酸酶。但是，化学合成法的成本比较高，并且只能合成那些已知化学结构的酶。 第五节 酶工程简介 分类 一是化学酶工程 即通过对酶的化学修饰或固定化处理，改善酶的性质以提高酶的效率和降低成本，甚至通过化学合成法制造人工酶。； 二是生物酶工程 用基因重组技术生产酶以及对酶基因进行修饰或设计新基因，从而生产性能稳定，具有新的生物活性及催化效率更高的酶。 化学酶工程 天然酶（从生物材料中分离纯化得到酶） 化学修饰酶（对酶分子的化学修饰改善酶的性能） 固定化酶（将水溶性酶用物理或化学方法处理，使之成为不溶于水的，但仍具有酶活性的状态） 人工模拟酶(用化学方法合成了人工酶催化剂) 生物酶工程 生物酶工程是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。 用基因工程技术大量生产酶(克隆酶)； 对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶(突变酶)； 全新设计新酶基因或者通过体外进化，合成自然界不曾有的新酶。 三、 酶工程的发展历程及概况 1878 德国的Kuhne 定义Enzyme 原意为在酵母中 1926 美国的Sumner从刀豆中得到脲酶结晶（1947年诺贝尔奖） 1970 美国的Smith 发现限制性内切酶（1979年诺贝尔奖） 1969 日本固定化氨基酰化酶，第一次将固定化酶成功地应用于工业生产。——酶工程诞生 1971年第一届国际酶工程学术会议在美国召开,当时的主题即是固定化酶，进一步开展了对微生物细胞固定化的研究。 1973年,千烟一郎首次利用固定化的大肠杆菌细胞生产L-天冬氨酸。 1978年,日本的铃木等固定化细胞生产 α -淀粉酶研究成功.所以说,70年代是固定化细胞技术取得进展的时期. 80年代，固定化细胞已能用于生产胞外酶,因此,80年代又发展了固定化原生质体技术,排除了细胞壁这一障碍 在酶的固定化技术发展的同时,酶分子修饰技术也取得了进展。 60年代，用小分子化合物修饰酶分子侧链基团,使酶性质发生改变; 70年代,修饰剂的选用、修饰方法上又有了新的发展。 1986 美国 核酶发现获得诺贝尔奖 此外,对抗体酶,人工酶,模拟酶等方面,以及酶的应用技术研究 ,在近20年均取得了较大进展,使酶工程不断向广度和深度发展,显示出广阔而诱人的前景。 磺胺药物的抑菌作用 b.非竞争性抑制 特点： ① I和S在结构上一般无相似之处，I常与酶分子上结合基团以外的化学基团结合，这种结合并不影响底物和酶的结合，增加底物浓度并不能减少I对酶的抑制。 ② 非竞争性抑制剂的双倒数曲线：有非竞争性抑制剂存在的曲线与无抑制剂的曲线相交于横坐标 -1/Km处，但纵坐标的截距，因竞争性抑制存在变大，说明该抑制作用，并不影响酶促反应的Km值，而使Vmax值变小，如下图所示： 非竞争性抑制 Vi＝ Vmax〔S〕 ( 1+ ) 〔I〕 Ki Km+ ( ) 〔S〕 1 Vi ＝ （1+ ） 〔I〕 Ki × （ ＋ ） 1 Vmax Km Vmax 1 〔S〕 第三节 酶的组成、分类与命名 酶 蛋白类酶 核酸类酶 催化其他分子进行反应 可催化酶分子本身， 也可催化其他分子进行反应 分子内催化R酶 分子间催化R酶 氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶（连接酶） 自我剪切酶、自我剪接酶 RNA剪切酶、DNA剪切酶、多肽剪切酶、多糖剪接酶、氨基酸酯剪接酶、多功能酶 1、分子组成 单纯蛋白酶 结合蛋白酶 酶蛋白 辅因子 辅酶 辅基 活性只取决于其蛋白质结构，酶只由氨基酸组成，不含其它成分。 除了蛋白质组分外，还含对热稳定的非蛋白小分子物质。 酶蛋白和辅助因子结合后所形成的复合物称为全酶。全酶可以表示如下： 全酶=酶蛋白 + 辅助因子 2、酶的命名 酶的命名通常有