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苏丹红四号对小鼠肝脏的损害 区煜君 李滢 刘泳烽 卢博喻 指导老师：雷俊霞 [摘要]目的：研究苏丹红四号对小鼠肝脏的损害。 方法：通过短期内持续大剂量用苏丹红四号喂养小鼠，再对小鼠肝功能的各项指标进行检测。 结果：小鼠GSH和ALT均升高，而且有随灌胃剂量提高而提升的趋势，提示小鼠肝功能受到不同程度的损害。 结论：短期内大剂量食入SudanⅣ对小鼠肝脏有损害作用 [关键词]苏丹红4号（SudanⅣ），肝功损害 1 引言 苏丹红系列是一种人工合成的红色染料，常作为一种工业染料，被广泛用于如溶剂、油、蜡、汽油的增色以及鞋、地板等增光方面，但近年发现常被非法商人加入食品中作为增色剂。其中，在辣椒酱、番茄酱中发现的苏丹红一号已被证实对小鼠肝脏、膀胱等脏器有致癌作用。而近日在“红心鸭蛋”中发现的苏丹红四号的毒性作用仍有争议。进入体内的苏丹红系列主要通过胃肠道微生物还原酶、肝和肝外组织微粒体和细胞质的还原酶进行代谢，在体内代谢成相应的胺类物质。本实验通过短期内持续用大剂量苏丹红四号喂养小鼠，再对小鼠肝功能的各项指标进行检测，以了解苏丹红四号是否会对小鼠肝脏造成损害，从而进一步推测其对人体的作用。 2 材料与方法 1）材料 ①实验对象：小鼠46只（随机），平均体重20g ②实验试剂及药品：苏丹红四号染料25g，ALT、GSH检测相应试剂盒 ③实验仪器：分光光度计，紫外分光光度计，胃饲管若干 2）方法：短期内持续用大剂量苏丹红四号喂养小鼠，再对小鼠肝功能的各项指标进行检测 ①取6只小鼠进行预实验。分别用0.125mg/ml 、0.25mg/ml SudanⅣ酒精溶液1ml各对3只小鼠进行灌胃，观察其耐受情况，以拟定实验剂量。 ②将余下小鼠分4组，每组10只，其中1组为阴性对照组，其余3组为实验组。预实验中所用6只小鼠组用作阳性对照组。 ③在实验期间，每天按下表剂量分别喂养小鼠 500倍剂量组 1000倍剂量组 5000倍剂量组 阴性剂量组 阳性倍剂量组 SudanⅣ质量（g） 0.00025 0.00050 0.00250 0 0.00500 95%乙醇体积（ml） 3 6 溶液总量（ml） 1000 溶液浓度（mg/ml） 2.50×10－4 5.0×10－4 2.5×10－3 0 5.0×10－3 每日灌胃溶剂量（ml） 0.5 1 每日灌胃SudanⅣ质量（μg） 0.125 0.250 1.25 0 5.0 *剂量说明： 1）据政府食品安全办公室公布红心鸭蛋检测结果，有毒红心鸭蛋SudanⅣ含量最高可达0.2-0.3mg/kg。已知一只鸭蛋约50克，设一个60kg正常人每天最多食入有毒鸭蛋5只，即正常人每日摄入SudanⅣ的最大可能量为1.25×10－3 mg/kg。查资料知，SudanI对小鼠的致癌量为人体的100－1000倍。所以我们分别以人每日最大摄入SudanⅣ量的500，1000倍剂量喂养小鼠。另由于实验时间较短，我们补充加入较大剂量5000倍组，以弥补实验时间的不足。 2）SudanⅣ溶于乙醚、乙醇、油脂、酚，不溶于水。由于乙醚、酚对机体有毒性作用，油脂不溶于水不能被稀释，所以我们选用乙醇作为SudanⅣ溶剂，但SudanⅣ在乙醇中溶解度较低，配制SudanⅣ溶液所需乙醇量较大。但是较大量的乙醇也会对小鼠肝脏造成损害，因此我们用等剂量乙醇喂养阴性对照组小鼠，以减低乙醇对实验结果的影响。 3）我们还设置超大剂量（20000倍剂量）组，希望做出小鼠肝损伤的阳性模型，以作对照。 ④实验结束时，用眼眶取血法取得血液样本进行肝功能检测，记录分析数据。 3 实验结果： 1）GSH、ALT检测结果 小鼠编号 GSH 结果判定 ALT 结果判定 500组 1号 317.7719 - 28.48599 - 5号 538.5965 + 362.6617 + 7号 390.4825 + 519.0177 + 1000组 2号 414.7193 + 308.8203 + 7号 616.693 + 608.9367 + 9号 506.2807 + 394.9609 + 5000组 1号 568.2193 + 624.752 + 5号 546.6754 + 492.4942 + 阳性对照组 2号 560.1404 + 608.0183 + 3号 611.307 + 483.3644 + 5号 342.0088 - 24.56797 - 阴性对照组 3号 317.7719 - 287.1227 + 5号 342.0088 - 39.75467 - 6号 422.7982 + 404.9026 + 7号 371.6316 + 392.7156 + 9号 277.3772 - 58.