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人教版教学课件名校联盟山东省新泰市第二中学2011-2012学年生物12基因工程的基本操作程序课件
基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序 获得目的基因的方法 1. 从基因文库中获取目的基因 获得目的基因的方法 PCR技术 原理: 前提: 过程: 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 基因操作的基本步骤 三、将目的基因导入受体细胞——转化 将目的基因导入各类细胞的方法 将目的基因导入植物细胞 将目的基因导入动物细胞 将目的基因导入微生物细胞 农杆菌转化法 你能说说农杆菌转化法的大概过程吗? 根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理,你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗? 如果想将一个抗病基因导入单子叶植物,理论上你认为该怎么做? 显微注射技术 将目的基因导入微生物细胞 利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素。若要生产人的糖蛋白,可以用大肠杆菌吗? 基因操作的基本步骤 四、目的基因的检测与鉴定 检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因 检测目的基因是否转录出mRNA 检测目的基因是否翻译成蛋白质 作业 1. 课本15页“思考与探究”第4题 2. 11页“寻根问底” * 1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 基因操作的基本步骤 一、提取目的基因—— 将需要的基因从供体生物 的细胞内提取出来。 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 限制酶 什么是基因文库? 什么是部分基因文库? 怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因? 目的基因的有关信息与什么相联系? 2.人工合成基因法——PCR扩增技术 PCR (polymerase chain reaction) ——聚合酶链式反应 是一项再生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术,可获取大量的目的基因。 PCR扩增仪 DNA双链复制的基本原理 一段已知目的基因的核苷酸序列 目的基因DNA受热变性,解链; 引物与单链互补结合; 合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸。 二、基因表达载体的构建——基因工程的核心 基因操作的基本步骤 目的: 所需物质: 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 它们各自的作用是什么? 启动子 终止子 标记基因 复制原点 目 的 基 因 表达载体 基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 用人工的方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌繁殖的速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。 将目的基因导入受体细胞并使之扩增 导入 扩增 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞吸收DNA分子 导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 分子杂交技术 1)以下说法正确的是 ( ) A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 2) 有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 练习 *
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