艾滋病检测方法及规范操作.ppt

HIV实验室检测及规范操作 中华医学会检验中心 联系艾滋病检测的方法 HIV抗体检测 HIV抗体初筛检测 HIV抗体确认检测（免疫印迹试验） HIV核酸检测 ?核酸序列依赖性扩增（NASBA） ?HIV定量逆转录PCR系统（RT－PCR） ?HIVRNA定量检测的分支测定法（bDNA) 艾滋病检测方法的意义 HIV抗体检测 酶联免疫吸附试验 ?间接法 ?直接法（双抗原夹心法） ?抗体竞争法 明胶颗粒凝集试验（PA） 快速法 HIV/AIDS的筛查，但初筛阳性结果不能做为艾滋病诊断依据，需将该标本送地区筛查中心实验室用两种方法进行复核，仍为阳性或一阴一阳则须送省确认中心。 艾滋病检测方法的意义 HIV抗体确认检测（免疫印迹试验） HIV/AIDS诊断的唯一依据,省CDC确认实验室负责全省 监测哨点以及常规检测中阳性及可疑标本的确认和省内 HIV初筛实验室的质量管理.另外,省检疫系统有一个确认 实验室,设在省检疫局保健中心. 国家对HIV抗体检测试剂的要求 ◆初筛试剂 筛查试剂必须是HIV1+2混合型的、经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。 ◆确认试剂 必须经国家食品药品监督管理局注册批准。 我国常用的HIV抗体检测试剂 ?HIV抗体筛查试剂 ?酶联免疫：初筛实验室的常用基本试剂。 ?明胶颗粒凝集 ?其它快速诊断试剂：在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区由经过培训的技术人员在规定的场所使用。 ?HIV抗体确认试剂 ?免疫印迹试剂 快速检测试剂的优缺点 硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ?优点 所需时间短 操作简便，不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ?缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。 HIV抗体检测程序及流程图 1、筛查试验 标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如呈阴性反应，报告为HIV抗体阴性；对呈阳性反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。 HIV抗体筛查结果的报告和处理 ?筛查试验呈阴性反应，出具HIV抗体阴性报告（提示应考虑窗口期的可能）。 ?筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV待复查”报告，不能出阳性报告。同时尽快进行以下处理： ? 填写HIV阳性标本送检单，并随标本送至当地筛查中心实验室，或直接送确认实验室。 ? 筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复测，如结果均阳性或一阴一阳，则应将该标本和送检单一并送至省艾滋病确认实验室确认。 ?阳性标本必须送省确认中心，筛查实验室不能随意处理。 ? 做好检测后的咨询 HIV抗体初筛检测结果解释 ? 阴性 (1)未感染HIV (2)可能感染了HIV,但处于窗口期,或HIV-1/2抗体和HIV-1O亚型抗体低于检测下限。 (3)疾病晚期,免疫功能缺损,抗体可能呈阴性. ?确认阳性 感染了HIV,样品含有HIV-1/2抗体和 HIV-1O亚型抗体(未满18个月的婴儿除外). ?不确定:建议追踪检测. HIV抗体初筛检测结果解释 ? 什么是不确定结果？ HIV抗体确认试验时,试验条带上出现的蛋白带型不足以判断为HIV抗体阳性,应建议其3个月后复查. ?如果复查结果阳转,表明受检者已感染HIV; ?如复查时条带全部消失,则为阴性结果; ?如复查时条带没有变化或有变化但仍不足以判断为阳性,则应建议其3个月后再复查一次,如还不能判断为阳性结果,则应作为阴性对待. HIV抗体初筛检测结果解释 造成检测结果不确定的原因 (1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖等，此时，身体产生的一些抗体与Ｐ２４核心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。 HIV抗体初筛检测结果解释 如何判断婴儿是否感染了HIV？ 通过胎盘，感染了HIV的母亲所生的婴儿可能带有来自母体的HIV抗体，此时HIV抗体检测阳性并不意味着已被感染。 ?建议在婴儿9个月时进行HIV初筛检测 如阴性，则判定为未感染HIV。 如阳性，则应在婴儿18个月时进行复检 阴性：判定为未感染。 阳性：则将血样送至省CDC