细菌和病毒的遗传性导、转导.ppt

制作：王洪刚 李斯深 第三节 细菌的遗传分析 三、性导 (sexduction) （二）F?因子 （二）F?因子 （二）F?因子 （三）、F?因子特点 四、转导(transduction) 四、转导(transduction) 四、转导(transduction) 普遍性转导 普遍性转导 普遍性转导 普遍性转导 普遍性转导 普遍性转导 利用上述实验可以说明三个位点之间的连锁关系。 实验1说明leu和azi相近，leu和thr则不相近。因为有一半时间从供体携带的leu+基因是由aziR伴随的；而只有2%的时间由thr+伴随。 普遍性转导 普遍性转导 局限性转导 细菌染色体图 应用中断杂交技术、重组作图、转化和转导相结合的方法已经得到细菌的非常详细的染色体图。 (图示) 左图-大肠杆菌的环状连锁图包含大约2000个基因。 细菌染色体图 1990年绘制的E. Coli连锁遗传图的一部分。此部分仅包括5分钟的距离(全图100分钟)。 局限性/特殊性转导 转移λ噬菌体插入位点两侧的细菌基因 λ噬菌体的不正确切离 实质与性导相似 高频转导(HFT) 与Hfr类似 可进行遗传作图 插入位点不稳定 P228 普遍性转导与局限性转导 原噬菌体的插入与切除： λ噬菌体的双链线状DNA分子在进入宿主细胞后，由其12个核苷酸组成的互补单链粘性末端形成共价键而闭合。 λ噬菌体int基因编码的酶催化环状噬菌体基因组附着位点attP与细菌染色体上attB之间的位点专一性重组 插入位点：gal与bio之间 bio+ bio+ bio+ bio+ bio+ bio+ 高频转导：通过双重溶源菌 E.coli ? phage ?dgal+ 非正常切离 感染gal- E.coli gal- gal+ gal- ?dgal+ ? 双重溶源菌形成 2 1 gal bio bio gal 若?dgal+进入的同时 ?也感染进去 bio- gal Benzer重组试验—基因的精细作图 Benzer(1955)用E. Coli烈性噬菌体T4突变型遗传研究证明： T4野生型在E. Coli菌苔上产生小而不规则噬菌斑 T4突变品系按表型可分为：rI、rII、rIII三类。其中rII在E. Coli B上产生快速溶菌现象，形成大而圆噬菌斑，在E. Coli K(λ)上不能生长 操作方法： 用两种rII突变型双重感染B品系，收集溶菌液 取等量溶菌液接种到B品系、K(λ)品系菌苔上 考察两个品系菌苔上的噬菌斑数目，就可以计算两个突变位点间的重组值 绘制连锁遗传图 由于采用了条件致死选择系统[即在E. Coli K(λ)上rII不能生长]，分辨率极高，可以检测到十万分之一的重组值 双重感染double infection试验 重组值检测精度可达十万分之一，实际结果不会低于0.01%?基因内存在最小重组单位 本泽尔将最小重组单位定义为重组子(recon) rII区段存在复等位基因已经表明 基因也并非最小突变单位 基因突变的最小单位?突变子(muton) 理论上讲突变子不必等于重组子。但以后研究显示：突变子和重组子都是一个核苷酸对或者碱基对(bp)。所以基因内每个碱基均可能发生突变，任意两个碱基间均能发生交换重组 互补测验原理 在限制条件下，能长出噬菌斑： 说明：两个突变型能发生功能互补，是两个基因。 在限制条件下，不能长出噬菌斑： 说明：两个突变型不能发生功能互补，是同一基因。 噬菌体突变型的互补试验 对于两个独立起源的、表型相似的隐性突变，如何判定是属于同一基因(功能单位)还是两个基因突变产生的呢 在二倍体生物中，可以建立双突变杂合体。双突变体杂合体有两种形式：顺式(cis)和反式(trans) p59 顺反测验与顺反子 根据两突变反式双杂合体的表现确定 突变型?无互补作用?为同一功能单位的突变 野生型?有互补作用?为不同功能单位的突变 互补测验，也称顺反测验(cis-trans test)。Benzer将顺反测验所确定的最小遗传功能单位称为顺反子(cistron) 顺反子内发生的突变间不能互补 p61 基因的顺反子测试示意图 p304 顺反测验 互补测验，也称顺反测验(cis-trans test)。Benzer将顺反测验所确定的最小遗传功能单位称为顺反子(cistron) 顺式排列只是对照，无实际意义；反式能区分功能单位。 顺式结构的效应不同于反式结构效应的现象称为顺反位置效应。 生物与酿酒工程学院 《遗传学》课程 第十章 细菌和病毒的遗传分析 第一节 细菌和病毒的特点 第二节 噬菌体的遗传分析 第三节 细菌的遗传分析 本章要求 思考题 大肠杆菌 一、