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在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么? 培养液配制 灭菌 接种 培养 * 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素 1、酵母菌的繁殖方式主要是: 2、酵母菌的呼吸方式是: 兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸) 回顾思考: 出芽生殖 3、酵母菌的培养条件要注意那些问题? 比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。 例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 介绍:血球计数板的构造 1、血球计数板:可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽, 其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网. 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25 X 16=400小格 16 X 25=400小格 计数室有长×宽:1mm×1mm, 2mm×2mm 3mm×3mm等 深度均为0.1mm。 5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4 mL 。 4、计数室的规格: 1mm 1mm 1mm 每个计数室共有400小格,总容积为0.1mm3 3、使用方法: 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. 如果使用16格×25格规格的计数室, 要按对角线位,取左上,右上,左下,右下 4个中格(即100个小格)的酵母菌数. 6、如何计数呢? 25个中格 16个中格 * * * * * * * * * 用规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (五点取样法) 每1ml菌液中所含的酵母菌个数 计算公式(如长和宽各为1mm) : (1)16格×25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数/ml= (100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数 10-4 即(100小格内酵母细胞个数/100)× 4× 106×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数 10-4 即(80小格内酵母细胞个数/80)× 4× 106×稀释倍数 7、 课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即4/10000mL即4×10 -4mL 则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数 计算公式(如长和宽各为2mm) : (1)16格×25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数/ml= (100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数 4×10-4 即(100小格内酵母细胞个数/100)×106×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数 即(80小格内酵母细胞个数/80)×106×稀释倍数 4×10-4 使酵母菌混合均匀,减少误差 不需要。因不同时间取样已形成对照 需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。 只计相邻两边及顶角的酵母菌 稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数 7. 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。 第 1 天 第 4 天 第 6 天 第 7 天 死亡 酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。 0 酵母菌细胞数(× 106个/mL) 时间 3.影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么? 无菌操作 培养条件 28 0.1 10 — C 5 0.1 — 10 B 28 0.1 — 10 A 温度(℃) 酵母菌母液/mL 无菌水/mL 培养液/mL 试管编号 针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。 7 6 5 4 3 2 1 平均 C3 C2 C1 平均 B3 B2 B1 平均 A3 A2 A1 C组 B组 A组 酵母菌细胞数量(× 106个/mL) 时间(d) 温度、营养物质对酵母菌生长的影响 1.通常用血球计数板对培养液中
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