实验二 - 显微镜油镜的使用及细菌的简单染色法1.pptVIP

实验二 显微镜油镜的使用及  细菌的简单染色法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、实验目的： 1.学习并掌握普通光学显微镜油镜的使用技术； 2.学习微生物制片、染色的基本技术，掌握细菌的 简单染色法及无菌操作技术； 3.观察细菌的基本形态。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、实验原理： 1、染色原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性 染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和 带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生 长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通 常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿 等）使其着色。酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷 的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细 菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等 酸性染料着色。中性染料是前两者的结合物又称复合染 料，如伊红美蓝、伊红天青等。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 简单染色法:是只用一种染料使细菌着色以 显示其形态的染色法，简单染 色不能辨别细菌细胞的构造。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2、显微镜油镜工作原理： Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.  利用油镜不但能增加照明度，更主要是能增加数值口 径，因为显微镜的放大效能是由其数值口径决定的。所 谓数值口径，即光线投射到物镜上的最大角度（称为镜 口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质的折射率所 得的乘积，可用下列公式表示：       N•A=n·sinα N•A:数值孔径 n:介质折射率 α：镜口角的半数  Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 显微镜的分辨率是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。它与接物镜的数值口径成正比，与光波长度成反比，因此接物镜的数值口径愈大，光波波长愈短，则显微镜的分辨力愈大，被检物体的细微结构也愈能明显地区别出来。 能辨别两点之间最小距离= 1/2光波长度÷数值口径 = 1/2λ÷N·A Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三 、实验器材 1、活材料： 培养18-24h的金黄色葡萄球菌(S.aureus) 和枯草芽孢杆菌（B.subtilis）。 2、染色液和试剂： 复红、美兰、二甲苯、香柏油。 3、器材： 载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2