微生物实验1细菌形态学.ppt

医学微生物学 实 验 一 细菌形态学 显微形态实验室 基本要求 1.显微镜为精密仪器，应严格按照操作规范使用。按照老师要求认真观看摆好的示教镜。 2.组织切片为易碎材料，应放置于指定位置，规范使用。 3.显微镜观察室严禁喧哗，有问题需举手示意，然后提问。 4.实验作业（绘图）写在实验报告册上，当堂交给带课老师 实 验 室 规 则 5.实验中待培养的材料应放在培养区，实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区，不得放在桌上或冲洗于水槽内。 6.实验完毕，值日同学负责整理清洁桌面打扫实验室，并关好水、电、门窗，洗手后方可离室。 一、实验内容 1、显微镜油镜的使用 2、革兰氏染色法 3、细菌的基本形态和特殊结构的观察 二、实验目的 1.掌握油镜的原理和使用方法。 2.了解革兰氏染色的原理及意义；掌握细菌涂片制作及革兰氏染色的基本操作方法。 3.能运用革兰氏染色对细菌进行分类。 革兰染色结果 原理 （1）等电点： G＋等电点低，带负电荷多，与带正电荷的结晶紫结合牢固 （2）细胞壁结构：成分、肽聚糖层数等 革兰阴性菌细胞壁结构 G+菌与G-菌细胞壁的区别 细胞壁 革兰阳性菌 革兰阴性菌 强 度 较坚韧 较疏松 厚 度 21~80nm 10~15nm 肽聚糖层 可达50 层 1~2层 肽聚糖量 50%~80% 5 %~80% 糖类量 约45% 15%~20% 脂类量 1%~4% 11~22% 磷壁酸 ﹢ ﹣ 外 膜 ﹣ ﹢ 2) 鞭毛（flagellum） 定义：为附着在某些菌体上的细长而 呈波状弯曲的丝状物 种类：单毛菌：如霍乱弧菌 双毛菌：如空肠弯曲菌 丛毛菌：如铜绿假单胞菌 周毛菌：如伤寒沙门菌 化学成分：蛋白质 性质：是运动器官 电镜下：基础小体 钩状体 丝状体 鞭毛的功能： ①鉴别细菌：鞭毛（动力）的有 无、数目、位置、排列、抗原 性 ②与致病性有关：粘附性 3)菌毛(fimbria or pili) 定义：某些细菌表面遍布着比鞭毛 纤细、短而直的丝状物。只 有在电镜下才能观察。 化学成分：主要是蛋白质 菌毛的种类与作用： ①普通菌毛：数量多，粘附于受体上---致病性 ②性菌毛：少，雄性菌（F+)，雌性菌（F-)---接合；噬菌体吸附受体 4)芽胞(endospore or spore) 定义:细菌在一定环境条件下，胞浆脱水浓缩，在菌体内形成的多层膜状结构的圆形或卵圆形小体。 形成条件：缺乏营养物质，有害代谢产物堆积 性质：是休眠状态，不是繁殖方式 种类： 功能: ① 鉴别细菌：大小、形状、菌体内的位置 ② 对细菌起保护作用：多层膜包绕，通透性降低 ③ 作为灭菌是否彻底的指标：抵抗力强 牙垢涂片革兰染色：镜下可见革兰染色阳性与阴性、排列不规则的球菌和杆菌，有时可见到螺旋体，注意将细菌与食物残渣、脱落细胞相区别。 【实验报告】 绘图： 1. 示教镜镜下图 2.自己制作的标本片镜下图 葡萄球菌 肺炎球菌 链 球 菌 2．杆菌 如大肠杆菌经革兰染色后呈淡红色杆状，两端钝圆，散在排列。 大肠杆菌 大肠埃希菌 鞭毛和菌毛 （透射电镜 ×42500） 3．螺形菌 如霍乱弧菌经革兰染色后呈红色弧形，菌体微弯，如逗点状，或呈眉毛状，散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。 幽门螺杆菌 4. 细菌的特殊结构 荚膜、芽胞、鞭毛、菌毛 1)荚膜(capsule)： 定义：某些细菌胞壁外围绕一层较厚的粘液性物 质，称为荚膜。 形成条件：动物体内、营养丰富的培养基内 化学成分：多糖 分类：荚膜、微荚膜、粘液层----糖被 功