肺炎支原体培养法应用.pptVIP

肺炎支原体（Mycoplasmapneumoniae，Mp） 肺炎支原体是一种对人有明显致病性的病原体，它能引起原发性非典型肺炎即肺炎支原体肺炎（Mycoplasma Pneumoniae pneumonia ）。 介于细菌和病毒之间的一种病原微生物 没有细胞壁，专性细胞内寄生 能在人工培养基上生长，生长缓慢，需2-3周以上。 显微镜下观察肺炎支原体 肺炎支原体检测的现状与临床 1、病原学检查：培养分离支原体 培养法和镜检鉴定，从患者咽部及胸水分离培养出Mp是诊断Mp感染的“金标准”；固体培养基培养MP操作繁琐，耗时长(通常需2-3周)，故未能普遍应用 2、血清学检测 （金标免疫斑点试验、酶免疫试验、直接荧光试验）血清学检查MP-IgM有临床意义但是受限因素多，发病后7-10天产生30天达峰,产生IgM后3-6月消失.免疫低下长期感染不易检出 3、分子生物学：聚合酶链式反应简称PCR（polymerase chain reaction） ,靶基因P1蛋白的特异序列作为引物进行PCR扩增，用于临床MP感染检测，灵敏度高。但因分泌物中经常存在PCR反应抑制物，对设备、技术要求也很高，容易污染，假阳性高 故此方法并未作为临床确诊MP感染的依据 开展MP快检的临床意义 MP所致的呼吸道感染患体征与常见的细菌、病毒感染极为相似，鉴别诊断难；支原体结构独特，常规治疗难以收效，其致病机理复杂，感染发病后若得不到及时的诊治容易诱发多种并发症； (Clin infect Dis,2001,30(9)1281) 临床上对肺炎支原体感染的诊断要求是要做到快速、准确，而现有的检测方法不能保证这方面的要求。 建立一种快速、准确、简便的检测方法是目前临床医患双方的迫切要求。 开展Mp快检的临床意义 Mp具有散在性、区域性流行的特点，利用Mp快检试剂在流行期可迅速查找、隔离病原体。 因此开展肺炎支原体快速检测对Mp感染的早期诊治，积极预防，合理选择使用抗生素，对保护患者身心健康，防止诱发其他并发症极为重要。 微生物检测技术背景 随着科学技术的发展，微生物快速培养新技术应用是当前微生物检测技术的突破。尤其是病原体的检测是当今医学研究领域公认的发展方向和必经的步骤。 利用传统培养方法改进其各种性能，推出MP快速培养试剂，加强MP检测的特异性、灵敏度，使疾病的诊断更加准确、快速、简便。 文献摘录一《肺炎支原体快速培养法与被动凝集法的临床应用》南通医学院儿科研究所 小儿MP肺炎疑似病例病程5天内的MP快速培养法与被动凝集法阳性率分别为42.1%（48/114）和23.7%（27/114），统计分析表明两种方法的阳性率有显著性差异 （X2=48.65 P＜0.5） 病程5天内两种检测方法的检测结果 被动凝集法 快速培养法 合计 + — + 27 0 27 — 21 66 87 合计 48 66 114 注：X2=48.65，P＜0.05 在病程5天内，Mp快速培养法与被动凝集法对小儿Mp肺炎的诊断价值：快速培养法的灵敏度为83.33%，特异性为95.0%；被动凝集法的灵敏度为50.0%，特异性为100%。 临床确诊 快速培养法 被动凝集法 + — + — Mp肺炎 45 9 27 27 非Mp肺炎 3 57 0 60 结论 早期进行MP 检查，对及时诊断及指导临床用药极其重要。由于MP特异性抗体受检测时机的限制，对MP感染的早期诊断价值有限，选择Mp快速培养法6-12小时得出结果作为早期检测，有助于临床医师实践支原体肺炎临床路径，规范治疗，减少成本，对临床诊断具有重要意义。 文献摘录二 《肺炎支原体的三种检测方法对照分析》 蔡利红 季伟 孙慧明 李蓓荃 严永东黄莉 陈正荣 闻芳 邵雪军 朱宏 苏州大学附属儿童医院呼吸科 目的 比较肺炎支原体的三种实验室检测方法，分析它们在不同年龄、不同病程的应用价值。 结果 1、193例患儿中,快速培养法检出47例阳性,血清MP-IgM检测法检出47例阳性, 痰MP-DNA-PCR法检出8例阳性；（表1） 表 1 三种方法检测肺炎支原体感染结果统计 方法 阳性数（%） 阴性数（%） 总例数 快速培养法 47（24.35） 146（75.65） 193 血清MP-IgM检测法 47（24.35） 146（75.65） 193 痰MP-DNA-PCR法 8（4.15） 185（95.85） 193 2、 在同一病程阶段，快速培养法检测MP感染阳性率高于第一份血清MP-IgM检测法 图 1 两种方法在不同病程阶段检测MP感染阳性率分布及比较 结论 快速培养法和血清MP-IgM检测法检测MP