RP-HPLC法测定复方鱼腥草片中金丝桃苷的含量_1.docVIP

RP-HPLC法测定复方鱼腥草片中金丝桃苷的含量 作者：黄秀红，冯灵平，廖建维，熊吉 【摘要】目的用RP-HPLC法测定复方鱼腥草片中金丝桃苷的含量。 方法 HPLC用外标一点法，KromasilC-18柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（18：82）为流动相，柱温为30，流速为1.0ml/min，λ=360nm。结果金丝桃苷在0.0675～1.35μg范围内呈良好线性,回归方程为Y=20.345X-12.118，R2=0.9999，平均加样回收率100.5%，RSD%为1.4%（n=9）。结论方法简便、准确，专属性强，测定结果重复性好。为复方鱼腥草片中鱼腥草的定量 分析 提供了 科学 有效的方法。 【关键词】复方鱼腥草片；金丝桃苷；HPLC 【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordeteminingthecontentofhyperosidEinFufangYuxingcaoPionbyRP-HPLC.MethodsUsingKromasilC18Column,acetonitrile-0.1%phosphoricacidsolution（18：82）asthemobilephase,detectionwavelengthas360nmandcolumntemperatureas30. The flowratewas1.0ml/min.ResultsThecalibrationcurvewaslinearatarangeof0.0675～1.35μgforthehyperosideandlinearequationwasY＝20.345X-12.118R2＝0.9999.Theaveragerecoverywas100.5%andtherelatedstandarddeviation（RSD）was1.4%（n=9）.ConclusionThismethodwassimpleandaccurateandproper, which canbeprovideforscientificquantitativeanalysismethodofhyerosideinFufangYuxingcaoPion,andthereduplicateoftheresultwasgood. 【Keywords】fufangyuxingcaotablet；hyperoside；RP-HPLC 复方鱼腥草片为《 中国 药典》收载品种，亦为民间常用药，具有清热解毒的功效，用于外感风热所致的急喉痹、急乳蛾，症见咽部红肿、咽痛；急性咽炎、急性扁桃体炎见上述症候者。本方由鱼腥草、黄芩、金银花、连翘等5味中药经提取加工制成。据现行药典及多数 文献 的报道，对复方鱼腥草片的质量控制多以黄芩苷作为指标进行 研究 。而在实际处方中，鱼腥草所占的量高达一半以上，为君药，故控制其中的鱼腥草的含量极其必要。现经实验论证，对方中的鱼腥草中所含的金丝桃苷的含量测定方法进行方法学研究，认为线性、重复性、回收率、精密度等均较理想。 1仪器与试药 Agilent1100系列高效液相色谱仪、G1322A（DEGASSER）溶剂脱气器、G1311A（QuatPump）四元泵、G1313（ALS）自动进样器、G1316A（COLOM）柱温箱、G1315B（DAD）检测器及Agilent工作站；UV－可见紫外分光光度计（SHIMADZU）；乙腈为色 谱纯，其余均为分析纯；对照品金丝桃苷Hyperoside（批号1521-200202）购于中国药品生物制品检定所；样品复方鱼腥草片由海正药业提供（批号为050301，050302，050303）。 2测定方法的研究 2.1测定波长的确定取金丝桃苷的甲醇溶液做光谱图测定，在360nm处有最大吸收，故检测波长选定360nm。 2.2流动相的选择根据文献报道及《中国药典》的采用的流动相，比较了（1）乙腈-甲醇-四氢呋喃（1：1：19.4：78.6）；（2）乙腈-0.1%磷酸（16:84），并设定柱温为30。根据上述二种流动相的实验结果，认为流动相（2）较理想。经调整，将“色谱条件与系统适用性试验”确定为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%磷酸（W/V）（18：82）为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长：360nm；柱温30。 理论 板数按金丝桃苷峰 计算 应不低于4000。色谱图1、2、3。图1金丝桃苷对照品色谱图2复方鱼腥草片样品图图3缺鱼腥草阴性样品图 2.3提取方法选择经查阅相关资料，对提取方法、提取溶剂、溶剂用量、提取时间进行考察，采用正交表L9（34）进行实验。见表1，2。表1复方鱼腥草片含量测定法正交试验的因素表2复方鱼腥草片含量测定法正交试验的计算 从对金丝