工厂化养殖杂色鲍致病菌副溶血弧菌的分离鉴定和其生理特性.pdfVIP

研究报告　REPORTS 工厂化养殖杂色鲍致病菌副溶血弧菌的分离鉴定及其生理特性 1, 2 2 3 4 2 邓先余 , 王智学 , 孙成波 , 陈晓艳 , 何建国 （1. 湖南科技大学 生命科学学院，湖南 湘潭 411201 ；2. 中山大学 生命科学学院, 广东 广州 510275 ；3. 广 东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524025 ；4. 暨南大学 生物工程学系, 广东 广州 510632 ） 摘要:从广东汕尾地区工厂化养殖的患病和死亡的杂色鲍(Haliotis diversicolor)及养殖海水 中分离到 3 株优势菌， 经回归感染试验, 证实所分离的细菌为杂色鲍的致病菌。经形态、 生理、生化等多项指标鉴定, 该菌株为副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus), 并经 ATB 微生 物自动鉴定系统证实鉴定结果。在中国大陆,由副溶血弧菌使杂色鲍致病并大量死亡的事件, 本文属首次报道。 关键词: 杂色鲍(Haliotis diversicolor)； 病原菌； 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) 中图分类号：S943 文献标识码：A 文章编号：1000 －3096 （2007 ）11-0033-06 杂色鲍(Haliotis diversicolor)是中国南方热带和 1.2 菌株 亚热带暖水性养殖的主要鲍鱼品种。广东沿海地区自 菌株 ZSU008 ，ZSU009 ，ZSU010 分别从患病杂 1993 年开始工厂化人工养殖,发展十分迅速,到 1999 色鲍、死亡杂色鲍和未过滤的养殖海水中分离。 年产量超过 1 600 t[ 1 ] 。然而随着养殖规模的不断扩 1.3 细菌鉴定系统 大，养殖环境日益恶化，各种病害频繁发生，越来越 革兰氏阴性杆菌鉴定条 ID32 GN 和 ATB 微生物 成为制约养殖发展的主要因素。引发鲍病的病原主要 自 动 鉴 定 系 统, 均 为 法 国 生 物 - 梅 里 埃 公 司 有细菌、病毒、寄生虫和立克次氏体等[ 2, 3 ] 。在各类 (bioMérieux)公司产品。 鲍病害中，细菌性疾病是最常见和最主要的疾病之 1.4 杂色鲍体内病原菌及海水中病原菌的分离 一，具有暴发快、流行广、死亡率高等特点，给中国 取不同来源的患病和死亡的杂色鲍，用 70 ％酒 鲍养殖业造成重大损失。而细菌病中又以弧菌病为 精消毒体表，以无菌操作取病鲍和死鲍的肝、腮、消 主，目前已报道的可引起鲍发生病害的弧菌主要有河流 化道、腹足、外套膜等组织，无菌剪刀将组织剪碎后 弧菌( Vibrio fluvialis) [4] 、溶藻弧菌( V. alginolyticus) [5] 、 用无菌匀浆器匀浆，在2216E 培养基平板上划线接种; 副溶血弧菌( V. parahaemolyticus) [5~7] 、创伤弧菌 海水中病原菌的分离：用灭菌 50 mL 塑料离心管取 ( V.vulnificus) [ 8 ] 、鲨鱼弧菌( V.carchariae) [ 9 ]和亮弧菌 40 mL 未过滤海水，室温下用离心机(Sorvall Super ( V.splendidus) [ 10 ]等。然而, 国内大多数病害研究主要 T21，USA)8 000 r/min 离心 5 min，弃上清，加无菌 集中在北方的养殖品种——皱纹盘鲍,有关杂色鲍的 海水 500 µL 悬浮沉淀，用接种环在 2216E 培养基平 病害研究的报道较为