孙异临4-电镜基本结构及成像原理.pdf

北京市神经外科研究所 孙异临 简要介绍 电子显微镜基本结构及成像原理 生物电镜标本制样技术 细胞超微结构及超微病理 电镜在疾病诊断和研究中的应用 电子显微镜基本结构及成像原理 电子显微镜发展历史 电子显微镜基本结构 电子显微镜基本成像原理 1665年 ： Robert Hooke(英国物理学家) 40~140 最早的光学显微镜300年前 (light microscope) 电子显微镜基本结构和原理 　　　上世纪20年代人们观察到在真空状态下，加 速电子形成的光源可以直线运行，电子光源波长 比可见光源小107倍。电磁埸对 电子光源可以进 行汇聚或放大。 　　德国柏林大学Ernst Ruska博士，在1931年利 用这一原理制造出第一台透射电镜(TEM) ,他在 1986年为此获得了诺贝尔物理奖。 电子显微镜研制 德国科学家Ernst Ruska于 1931年设计并制造了第一台电 子显微镜,这一发明使人类在形 态学研究方面又产生了一次新 的飞跃，进入了超微结构领域。 （ultrastructure） 伟大的发明者 Ernst Ruska(1906-1988) 电子显微镜 是人们认识微观世界的钥匙和工具 电镜的电子光源解决了光学显微镜受自 然光波长限制的问题。 　　电镜使人类对世界的认识从微米提高到 了纳米水平；在生命科学方面，从细胞水平 提高到了分子水平。 电子显微镜基本结构和原理 分辨率Resolution Power （分辨本领） 　　 　 分辨率指可以分辨两个最小物体之间距离的能 力。人类对于生物体结构的认识，最初只是在肉眼 观察所及的范围。人的视力只能看到0.2毫米以上的 物质。  人眼的分辨本领为0.2mm  光学显微镜的分辨本领为0.2um （可放大1000倍）  电子显微镜的分辨本领为0.14nm （可放大80万倍） 电子显微镜基本结构和原理 光镜与电镜成像原理比较 光学显微镜: 可见光源 ( 自然光或灯光） 聚光镜(玻璃) 标本石蜡切片 物镜 目镜 成像 电子显微镜： 电子光源 （不可见光） 电磁透镜 （线圈电流） 标本超薄切片 物镜 中间镜 投影镜 荧光 屏成像 电子显微镜基本结构和原理 　　　 电镜光路的设计与光学显 微镜相似。光学显微镜的光源 被电子枪取代，玻璃镜片以电 磁透镜取代。 　　从电子枪到荧光板的整个 电子光路都必须在真空状态下 进行最终在，荧光板上成像。 　　通过改变电磁透镜线圈 电流的大小来改变焦距和变换 放大倍数。 电子显微镜基本结构和原理 分辨能力大小受到光波波长的影响 1.光学显微镜是利用可见光成像，可见光的波长为 390纳米，所以在光镜下不可能看到小于这一波长 的物质。 2. 电子显微镜是利用电子光源成像，这种不可见光 的波长可随电压的升高而缩短，当电镜高压加到 100千伏安时其波长仅为0.00387纳米，所以电镜的 分辨力已达到0.14纳米。 　电子显微镜基本结构和原理  光学显微镜通常使用的长度单位为微米以ｕ代 表(micron meter)，是千分之一毫米。如红细 胞的直径约为7u 1 ｕm 10-3mm 10-6M  电子显微镜通常使用的长度单位为纳米，以 nm代表(nan