猪的采血.docVIP

动物的血样采集和血清分离方法 责任编辑：张丽娟 发布时间：2012-10-12 一、不同动物采血部位和方法 1、家禽采血：心脏采血法易使被采血家禽因失血过多而死亡，所以在常规免疫监测中较少使用。常选以翅下静脉采血，助手抓住两鸡腿，将家禽右侧卧右翅压鸡体身下，采血者右手持5ml一次性注射器，左手食指中指固定左翅拇指压住近心端翅静脉，右手将针尖接近平行刺破表皮和血管壁，感觉无阻力时缓缓拉动注射器的活塞，血液便缓缓进入注射器内。鸡皮和血管壁薄，应注意针尖斜面与角度倾斜大或力度大会刺破双层血管而发生血肿现象。采血完毕后,用干棉球压紧采血部位拔出注射器,持续压采血部位1~2 min,至不出血为止,采血部位消毒。2.猪的采血： A猪采血较困难，一般小猪选取前腔静脉采血。 前腔静脉的解剖位置及采血的部位：猪的前腔静脉是注入右心房的静脉干，在胸腔前门由左、右颈静脉和左、右腋静脉汇合而成。采血部位就在第一肋骨与胸骨柄结合处的前侧方呈两个明显的凹陷窝。由于左侧靠近膈神经，故多于右侧凹陷窝进行采血。采血针头刺入方向呈近似垂直并稍向中央及胸腔方向，刺入深度依猪体大小而定，一般 2~6cm 。一般30千克以下的猪其体重、体型都比较小一点，采取仰卧保定方式。一位保定人员分别抓住小猪的 2 只后腿向后拉或倒提，一位保定人员左手把住嘴使头部贴地稍向右偏，另一只手把住猪的一只前腿。消毒皮肤后，采血人员左手可以调整猪的一条腿使前肢与体中线基本垂直，这时凹陷窝达到最深的程度右手持5ML一次性注射器向右侧凹陷窝处，由上而下针尖对准对面的肩胛角或稍偏向中央及胸腔方向刺入，见有回血，即可采血，一般3～4毫升，采血完毕，左手拿酒精棉球紧压针孔处，右手迅速拔出采血针管，为防止出血，应压迫片刻，并涂擦碘酒消毒。 B成猪或稍大些的猪采取套猪器套住猪的上颌向上提拉保定，选取耳静脉采血，以前用一次性注射器耳静脉易瘪造成血量不够，我的经验是用人用一次性真空采血管，先用针刺破血管有血回流后再另一头插入真空管内，此法采血有如下的好处： A一次性真空采血管内含惰性凝胶物质和促凝剂, 对血液有促凝血、促血清分离作用, 具有血清分离快而且多、受温度影响小、分离血清可利用的特点。 b使用一次性真空采血管, 可减少溶血现象的发生。因为在采血过程中血液是在小负压作用下沿着管壁慢慢注人采血管中, 红细胞不易被破坏同时 HYPERLINK / 采血管内均涂有的硅酮可以避免血细胞附壁, 防止离心时血细胞破碎, 不易溶血。这就减少了因溶血因素对检测结果产生的影响, 保证了测定结果准确性。 c. 一次性真空采血管具有一次性安全粘合封口,管中的血液成分和外界环境始终处于隔离状态, 避免了血液被污染, 使血液在采集、运送、编号、离心过程中不易洒血, 有效的避免了采血人员手指接触血样, 防止了人员感染和环境污染。 3、牛，马、羊的采血部位是颈静脉。采取站立保定动物,颈静脉沟剪毛,消毒,术者站立用一手压迫颈静脉下端,使颈静脉充沛怒张,另一手持好5mml一次性注射器斜45°角刺入颈静脉l~2 cm,血液即可流出,中止采血后,先松手,后拔出针头,并用消毒棉球压榨采血部位1 min。以前用16号针头用力掼进血管有时因力度大血管压力大往往照成血液喷出尤其在布病检疫过程中易造成采血人员感染，而一次性注射器则避免了这点，由于5ML注射器针尖细而锋利牛羊感觉不到疼痛也利于保定。二、血清分离注意的事项 1、采血时，采血者要认真做好自身防护工作，采血设备需经消毒干燥以防溶血同时要做好采血记录。 2、采到血液后，应立即将注射器内的血液沿着试管壁徐徐注入，不能有气泡，也不能振荡，同时倾斜放置好。夏天在常温下即可，冬天要保存在25~37 ℃温水中放置30min~45min，以利血清析出。或者先放在温暖的地方静止30分钟后在移动运送，否则不易析出血清。 3、在送样过程中，血样不可剧烈摇晃以免溶血，血样送至实验室后可用离心机2000-3000转/分立即分离得到血清，不能立即分离的需及时置于25°C以上的地方过夜以便析出血清。 4、如果是鸡血或血量在2-3ML左右也可放在注射器内但一定要将活塞拉出血面一段距离也就是血面和活塞中间留有一段距离的空气，距离越大越好。在拉动过程要缓慢不要出现气泡这样才易出血清。 5、在采血过程中一定要注意如果用一次性真空管时血液应不间断地流入管中一旦血流间断要另换管否者不易析出血清。 6、我们在做血清分离的时候,有时把血液离心后会出现血清变成胶冻样,笔者总结几点原因：采血后放置时间不够；动物个体差异；采血时间应在采食前或采食后2小时以后；室温低。当出现胶冻时要将胶冻与血凝块分离将胶冻放于温度35度左右的温箱内一段时间胶冻会自动化开或用玻璃棒挤压胶冻也可析出血清。 7、静脉的深浅不一样，要求使用的针头也是不一样的，