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角膜及眼表疾病 p27Kip1基因RNA干扰对牛角膜内皮细胞增殖的影响 黄渝侃1 张明昌1 王勇2 范可顺1 张光红1 1华中科技大学附属协和医院眼科 2武汉爱尔眼科医院 【摘 要】目的 探讨针对细胞周期性激酶抑制剂p27Kip1的小发夹RNA(shRNA)表达质粒对牛角膜内皮细胞增殖能力的影响。方法 设计有发夹状结构的三条p27Kip1-shRNA对应模板DNA序列，并构建无关序列HK-shRNA作为阴性对照。构建并鉴定重组质粒Pgenesil-P1、Pgenesil-P2，Pgenesil-P3和Pgenesil-HK。以脂质体法将4种重组质粒分别导入牛角膜内皮细胞。稳定转染后RT-PCR法和Westem blot法检测牛角膜内皮细胞内p27KiplmRNA及蛋白水平，筛选出抑制效果最好的阳性siRNA质粒。用MTT法检测该质粒组及对照组细胞生长情况。流式细胞术检测各组细胞周期的分布。结果 酶切及测序证实4个重组质粒均构建成功。与空白对照组比较，Pgenesil-P、Pgenesil-P2，Pgenesil-P3各组mRNA及蛋白表达水平均受到抑制，尤以PgenesiI-P3抑制效果最明显。空白对照组与Pgenesil-HK无显著性差异。与空白对照及阴性siRNA相比，Pgenesil-P3组牛角膜内皮细胞生长增快，增殖能力增强，G1期细胞比例下降，S期比例增加。结论 针对细胞周期性激酶抑制剂p27Kip1的shRNA可有效降低其的表达水平，并可使牛角膜内皮细胞增殖能力提高。RNA干扰介导的p27Kip1基因沉默可能是促进角膜内皮细胞再生的有效手段。 王 媛 唐逸斐 武汉市东西湖区人民医院眼科 430040 【摘 要】目的观察单纯白内障超声乳化+人工晶体植入术或联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的疗效。方法选取4O例青光眼合并白内障术前眼压控制正常的患者，随机分成两组(I组2O例)行单纯白内障超乳+人工晶体植入术；另一组(II组2O例)行白内障超乳+人工晶体植入+小梁切除术，术后随访6个月观察二组患者眼压、视力情况。结果 I组术后平均视力O.5，术后平均眼压13.3mmHg(1mmHg=O.133kpa)，II组术后平均视力O.5，术后平均眼压11.8mmg两组比较眼压及视力情况均无显著异常(PO.05)。结论对于青光眼合并白内障的患者，若发病时间短，术前眼压控制正常范围，采用单纯白内障超乳+人工晶体植入术治疗青光眼合并白内障，具有恢复有用视力控制眼压满意的理想效果。 角膜干细胞移植或带活性角膜缘板层移植联合羊膜移植在眼表成型中的应用 姜冬玲 陈宏 黄琼 肖青 华中科技大学同济医学院协和医院眼科目的探讨角膜干细胞移植或带活性角膜缘的板层角膜移植联合羊膜移植在眼表成型中的方法及效果。方法结膜囊狭窄、睑球粘连、结角膜假性胬肉、血管化角膜混浊等引起眼表变形、泪液动力学改变、眼球运动障碍、眼内翻倒睫及视力下降等患者应用角膜干细胞移植或带活性角膜缘的板层角膜移植联合羊膜移植行结膜囊重建及眼表成型。结果57例患者平均随访4～27月，2例因同种异体排5例轻度、3例中度结膜囊缩短；其余患者均能较好的重建眼表。结论角膜干细胞移植或带活性角膜缘的板层角膜移植联合羊膜移植眼表成型效果良好。 武汉大学人民医院眼科 430060 【摘 要】目的 观察老年人翼状胬内显微切除联合角膜缘干细胞移植术的临床疗效。方法 2005年1月-2006年4月对46例56眼翼状胬肉（包括8只眼复发性翼状胬肉）行显微镜下根治性切除术，而后取自体上方游离的带角膜缘的球结膜修补角巩膜暴露区。术后用贝复舒滴眼液qid连用一周，停药。术后第一天开始用典必殊滴眼液q3h，并逐渐减量，持续用25天。结果 随访观察3~12个月，平均7个月，翼状胬肉治愈率96.5%。术后视力：0.1以下者0眼，0.12～0.3者40眼，0.4～0.6者14眼，0.7以上者2眼。所有病例角膜上皮3~6天内修复，结膜充血水肿在2~4周内消退，刺激症状轻微。结论 显微镜下翼状胬肉根治性切除联合自体角膜缘干细胞移植术能最大限度地彻底切除病变组织，配合术后合理用药能有效降低术后复发率。 局部应用Everolimus延长大鼠同种植片存活的实验研究 李 晓 青华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科目的Everolimus是一种新型的增生信号抑制剂，它具有很强的免疫抑制活性。以前的研究显示全身应用该药能显著延长实验性同种角膜移植的存活时间。通常局部应用免疫调节剂能减少药物的副作用。本实验研究局部应用Everolimus防治大鼠同科，角膜移植排斥反应的效果。方法将MHCI/II完全不相容的供体DA大鼠的3.5mm角膜植片移植给45只Lewis雌性大鼠。并随机分为三