Trizol（总RNA抽提试剂）.PDFVIP

Trizol (总RNA抽提试剂) 产品编号 产品名称 包装 R0016 Trizol (总RNA抽提试剂) 100ml 产品简介：  碧云天生产的Trizol是一种用于细胞或组织总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方 法，抽提的方法和步骤完全相同。  Trizol 的颜色和TRIzol相同，加入氯仿后上层呈无色，下层呈紫红色，便于吸取上层水相。  Trizol对动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提均适用。  Trizol可以抽提长达15 kb的RNA ，也可以抽提microRNA等小RNA 。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。  Trizol抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。  裂解细胞或和组织共匀浆时，Trizol可以保持样品中RNA 的完整性，即可以有效抑制RNA 的降解。  每一百万细胞用Trizol抽提可得5-15g RNA ；每毫克组织用Trizol抽提可得1-10g RNA 。产量因细胞和组织不同而异。  抽提两个样品约需一小时。  Trizol抽提所得RNA可直接用于Northern ，点杂交，纯化mRNA ，体外翻译，RNase protection assay ，cDNA克隆，以及RT- PCR ；也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。  碧云天生产的Beyozol(R0011)和Trizol(R0016) 的成分有细微差别，实际抽提效果无任何显著差异。  每100ml Trizol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 R0016 Trizol 100ml — 说明书 1份 保存条件： 4 ℃保存，一年有效。 注意事项：  需自备氯仿，异丙醇，DEPC ，75% 乙醇(DEPC水配制) ，和DEPC水。DEPC(ST036) ，DEPC水(R0021)可向碧云天订购。  所有离心管，枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可 考虑用0.01% 的DEPC水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至 重蒸水或Milli-Q级水中，处理过夜，灭菌即成DEPC水。  使用冻存的细胞或组织抽提总RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内 的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA ，推荐先加入适量Trizol，并裂解样品后冻存。  必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着RNA样品呼气或说话，以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。  Trizol含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol，请立 即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。  Trizol抽提总RNA 的同时，理论上也可抽提蛋白和DNA ，但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol 的操作步骤进行 操作。  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 细胞裂解或组织匀浆。 a. 贴壁细胞 吸尽培养液，每10平方厘米细胞加入1ml Trizol。一般六孔板每孔加1ml Trizol，12孔板每孔加0.5ml Trizol 。晃动3-5 下，再用枪吹打2-3下，确保全部裂解，然后吸至离心管中。 b. 悬浮细胞 离心收集细胞，吸尽液体，每五百万至一千万动植物或酵母细胞，或一千万细菌，加入1ml Trizol。用枪吹打或适当 vortex ，确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充