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2002.9 WJFX-ch14 吸光光度法 第10章 可见光分光光度法 10.1 基本原理 10.2 可见光分光光度法 10.3可见光分光光度法的应用 概 述 10.1 可见光分光光度法的基本原理 10.1.1 物质对光的选择性吸收与物质的颜色 10.1.2 光吸收的基本定律 10.1.3 偏离朗伯-比尔定律的原因* 10.1.1 物质对光的选择性吸收与物质的颜色 （1）物质对光的选择性吸收 （2）吸收曲线 吸收曲线的特点： 10.1.2 光的吸收定律 （1）朗伯—比耳定律 透光度(透光率)T （2）摩尔吸光系数ε的特性 例题 一有色化合物的0.0010%水溶液在2cm比色皿中测得透射比为52.2%。已知它在520nm处的摩尔吸光系数为2.24×103L/(mol·cm)。求此化合物的摩尔质量。 解： A = -lgT = ?bc = ?b×(0.0010×1000/100)/ Mr = ?b×0.010/ Mr M r = ?b×0.010/(-lgT ) =2.24×103×0.010×2 / (-lg0.522) = 159 (g/mol) 10.1.3 偏离朗伯—比耳定律的原因* （1）物理性因素 ——非单色光引起的偏离 非单色光作为入射光引起的偏离 （2） 化学性因素 10.2 可见分光光度法 10.2.1分光光度计的基本部件 10.2.2显色反应及影响因素* 10.2.3 吸光度测量条件的选择 10.2.1 分光光度计的基本部件 （2）单色器 （3）吸收池 附： 几种常用的分光光度计 10.2.2 显色反应及其影响因素* （1）显色反应及其选择 （2）显色剂 （3）显色反应条件的选择 （1）显色反应及其选择 (2) 显色剂 (3)显色条件的选择 （3.6）共存离子干扰的消除 10.2.3 吸光度测量条件的选择 （1）入射光波长的选择 （2） 参比溶液的选择 控制适宜的吸光度 10.3 可见光分光光度法的应用 10.3.1 高含量组分的测定 10.3.2 多组分分析 10.3.1 高含量组分的测定 （1*）微量组分的测定（标准曲线法） （2） 高含量组分的测定（示差法） 课堂练习1： 某显色剂与Co(Ⅱ)形成有色络合物,在?max=598nm处测得吸光度A为0.58,则透射比T=？ 某显色剂与Cu(Ⅱ)形成有色络合物,在?max=540 nm处测得透射比T=70.0%,其吸光度A=？若使用的仪器测量误差(?T)为±0.5%,上述两结果由仪器测量引起的浓度相对误差分别为多少？ 解： (a) A=-lgT, 则 T=10-A=10-0.58=26.3% 课堂练习2： 欲测定某有机胺的摩尔质量,先用苦味酸(M=229g/mol)处理,得到苦味酸胺(系1:1的加合物)。今称取此苦味酸胺0.0300 g,溶于乙醇并配制成1L溶液, 用1.00cm的比色皿,于其最大吸收波长380nm处测得吸光度为0.800[已知苦味酸胺在380nm处的摩尔吸光系数? =1.3×104L/(mol·cm) ]。试求该有机胺的摩尔质量。 解： 已知：配制苦味酸胺 0.0300 g /L， 苦味酸胺在380nm处的 ? = 1.3×104 L/(mol·cm) A= 0.800 ， b= 1.00cm。 c = A/ ? b = 0.800 /1.3×104×1.00 = 6.15×10 -5 (mol/L) M(苦味酸胺) = 0.0300 (g /L)/ 6.15×10-5 (mol/L) = 488 (g/mol) 又：苦味酸M=229g/mol， 则：该有机胺的摩尔质量M = 488 - 229 =259 (g/mol) 10.3.2 多组分分析 可见光分光光度法（复习） 可见光分光光度法的学习要求 1.掌握吸光光度法的基本原理； 2.了解分光光度计的种类及使用方法； 3.了解显色反应与测量条件的选择； 4.掌握吸光光度测定方法及应用； 5.掌握721型分光光度计的主要部件。 (b) A=-lgT=-lg0.70=0.155 ⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 可分别在λ1和λ2时，测定组分a和b而互相不产生干扰。 ⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= εaλ1bCa ＋ εbλ1bCb Aλ2= εaλ2bCa ＋ εbλ2bCb 1.物质对光吸收的本质 M（基态）＋ hν→M*（激发态） ΔE = E2 - E1 = hν 2.光的吸收定律（重点） (1) 朗伯-比耳定律 A