直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物探.PDF

２０１６年１２月 中国实验动物学报 Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２０１６ 第２４卷　 第６期 ＡＣＴＡ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＵＭ ＡＮＩＭＡＬＩＳ ＳＣＩＥＮＴＩＡ ＳＩＮＩＣＡ Ｖｏｌ． ２４　 Ｎｏ． ６ 研究报告 直接多肽结合试验组合人细胞系活化 试验预测皮肤致敏物的探讨 １，２ ２，３ ２ ３ １ ∗ 柯逸晖 ，陈彧 ，程树军 ，徐嘉婷 ，谈伟君 （１．广东药科大学，广州　 ５１０００６；２．广东出入境检验检疫局技术中心，广州　 ５１０６２３； ３．广州市华代生物科技有限公司，广州　 ５１０５３５） 　 　 【摘要】　 目的　 建立直接多肽结合试验（ＤＰＲＡ）和人细胞系活化试验（ｈ⁃ＣＬＡＴ）的皮肤致敏组合检测方法， 对化学品及植物提取物的致敏性进行初筛。 方法　 选择 １２ 种化学品和７ 种植物提取物为受试物，把不同受试物 分别与两种肽（半胱氨酸肽和赖氨酸肽）共孵育２４ ｈ，采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。 同时将不同浓度 的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞（ＴＨＰ⁃１）共孵育２４ ｈ，通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标 志物ＣＤ８６和ＣＤ５４ 的变化。 再进一步比较ＤＰＲＡ和ｈ⁃ＣＬＡＴ预测结果的一致性。 结果　 ＤＰＲＡ方法和ｈ⁃ＣＬＡＴ方 法准确区分了１２种化学品的皮肤致敏性，其中２种判定为阴性，１０种判定为阳性，两种方法检测结果一致。 ＤＰＲＡ 对植物提取物致敏性的预测中，除绿茶提取物无法判定外，其余６ 种均为皮肤致敏疑似物质。 ｈ⁃ＣＬＡＴ 预测中，除 绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物，其余４ 种植物提取物为致敏物。 ＤＰＲＡ与ｈ⁃ＣＬＡＴ预测的 一致性为０５７。 结论　 ＤＰＲＡ与ｈ⁃ＣＬＡＴ 的简单组合可以实现对单一化合物的准确预测，对于复杂混合物可实现 初步预测，确认需要进一步组合其他方法。 【关键词】　 直接多肽结合试验；人细胞系活化试验；皮肤致敏；替代方法 【中图分类号】 Ｑ９５⁃３３　 　 【文献标识码】 Ａ　 　 【文章编号】 １００５⁃４８４７（２０１６）０６⁃０６１１⁃０７ Ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－４８４７２０１６０６０１１ Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｆｏｒ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ ＤＰＲＡ ｗｉｔｈ ｈ⁃ＣＬＡＴ ｔｏ ｐｒｅｄｉｃｔ ｓｋｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ １，２ ２ ，３ ２ ３ １∗ ＫＥ Ｙｉ⁃ｈｕｉ ，ＣＨＥＮ Ｙｕ ，ＣＨＥＮＧ Ｓｈｕ⁃ｊｕｎ ，ＸＵＪｉａ⁃ｔｉｎｇ ，ＴＡＮ Ｗｅｉ⁃ｊｕｎ （１． Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０００６，Ｃｈｉｎａ；２． Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ