响应面法优化藏药毛莲蒿总香豆素的超声辅助提取工艺.pdf

第 41卷 第6期 西 南 师 范 大 学 学 报 (自然科学版) 2016年 6月 Vo1．41 No．6 JournalofSouthwestChinaNormalUniversity(NaturalScienceEdition) Jun． 2016 响应面法优化藏药毛莲蒿总香豆素的 超声辅助提取工艺① 杨正明 ， 滕 云 ， 韩亚涛 ， 李 波 ， 王景富 ， 刘 圆。 1．西南 民族大学 化学与环境保护工程学院，成都 610041；2．西南 民族大学 民族医药研究院，成都 610041 摘要：通过单因素实验法考察 乙醇体积分数、浸提时间、浸提温度 、料液 比及超声时间对毛莲蒿总香豆素得率的影 响，并通过 Box-Behnken试验设计优化毛莲蒿总香豆素的超声辅助提取工艺．结果表 明，毛莲蒿总香豆素的最佳提 取工艺为乙醇体积分数 72 ，浸提时间 71min，浸提温度 68℃，料液 比 1：58(g／mL)及超声时间30min，在该条 件下毛莲蒿总香豆素的平均得率为 3．45 ．优化后的提取工艺方便、可行，可为毛莲蒿中总香豆素类化合物的提 取提供参考． 关 键 词 ：毛莲蒿 ；总香豆素 ；响应面法 ；超声波辅助 ；提取工艺 中图分类号 ：R931 文献标志码 ：A 文章编号 ：i000—5471(2016)06—0074—07 毛莲蒿 (ArtemisiavestitaWal1．)为菊科蒿属植物 ，藏药名普尔那 ，是西藏 自治区藏药厂生产的结血蒿 膏的主要组成源药材 ]，具有极高的药用价值[3]，是作为防治瘟疫 、止血以及抗炎消肿等的常用藏药材 之一l7]．课题组前期研究表明，毛莲蒿中含有黄酮类 、有机酸、香豆素 、生物碱 、挥发油及油脂 、甾体或三 萜类等化学成分 ]．其中，香豆素类化合物具有抗艾滋病 、抗癌、抗氧化 、抗炎及平滑肌松弛等多方面的生 物活性[9-io]，但毛莲蒿中总香豆素的研究却鲜有报道 ，伞形花 内酯为香豆素类化合物 ，因此 ，本文拟采用 热浸一超声辅助的提取方法，以伞形花 内酯为对照品，通过响应面法优化 出最佳提取工艺，以期为藏 民族 药用植物毛莲蒿资源的进一步开发和利用提供一定 的实验指导和理论依据． 1 仪器与材料 TU一1950型双光束紫外可见分光光度计 ，北京普析通用仪器有 限责任公司；KQ一250B超声波清洗器 ， 昆山市超声仪器有限公司 ；ESJ200—4电子天平 ，沈阳龙腾电子有 限公司；HH一2数显恒温水浴锅 ，国华电 器有限公司 ；HX一200型高速中药粉碎机 ，浙江永康溪岸五金药具厂． 毛莲蒿药材于 2013年 11月 6日购于西藏藏药厂 ，经西南民族大学刘 圆教授鉴定为菊科蒿属植物毛莲 蒿的地上部分，粉碎 ，过 3号筛，备用；伞形花内酯对照品(批号：MUST成都曼斯特生物有限 公司)；水为纯净水 ；无水乙醇为分析纯． ① 收稿 日期 ：2015—06—23 基金项 目：国家 自然科学基金项 目；四川省应用基础计划项 目(2014JY0181)；西南 民族大学研 究生学位 点建设项 目 (2015XWD—SO7O3)． 作者简介 ：杨正明(1990一)，男，云南丽江人，硕士研究生，主要从事少数民族药物的研究． 通信作者 ：刘 圆，博士，教授． 第6期 杨正明，等 ：响应面法优化藏药毛莲蒿总香豆素的超声辅助提取工艺 75 2 方法与结果 2．1 毛莲蒿总香豆素质量分数测定 2．1．1 对照品溶液的制备 精密称取 3．3mg的伞形花内酯对照品，用无水 乙醇定容至 25mL，摇匀 ，即得 0．132g／mL的伞形花 内酯对照品溶液． 2．1_2 线性关系的考察 精确量取 0．15，0．20，0．25，0．30，0．35，0．40，0．45，0．50，0．55mL对照品溶液 ，精确加入无水 乙醇至 9mL，摇匀 ，以无水乙醇作对照，于 325ilm处测定其吸光度．以伞形花内酯质量浓度 (C)为横坐标 ，吸光 度 (A)为纵坐标 ，绘制标准曲线 ，得到线性回归方程为 A一91．636C+0．0437，R。一O．9997，表明伞形花 内酯对照品溶液在 2