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第七章 细菌和病毒的遗传
第一节 细菌和病毒的结构
第二节 细菌的遗传分析
第三节 噬菌体的遗传分析
第一节 细菌和病毒的结构
细菌和病毒的结构及其遗传特点,使它们成为遗传学研究的好材料。转化试验、一个基因一种酶假说、基因的精细结构、基因表达的调控、基因工程等遗传学的重大发现和技术发展都与细菌和病毒有关。
一、细菌的结构
单细胞生物,大小不一,一般长1- 2μm,宽0.5μm,为一层或多层膜或细胞壁所包围。部分细菌还有某些特殊的结构,如鞭毛、伞毛、荚膜等。
细菌的细胞核没有核膜,其中的染色体是一个很长的共价闭合环状双链DNA分子,长度从250-3500μm不等,一般不与蛋白质结合。
多数细菌细胞在细胞核外还有一个或多个能自主复制的小型环状DNA。这些DNA分子对细菌的生长并非必需,但可赋予细菌某些特性,如抗药性、抗盐性、抗噬菌体侵染等。这些小分子DNA称为质粒(plasmid)。
细菌能在成分十分简单的培养基上生长,这种培养基叫基本培养基。细菌在这种培养基上能合成生长所必须的各种有机物。单一细胞经过分裂而增殖,大致20分钟繁殖一代,逐渐形成肉眼可见的菌落。
二、病毒的结构
病毒为非细胞结构,没有自身的代谢机能,不能独立地生长和繁殖,必须寄生在活细胞中,利用活细胞的营养物质合成新的病毒后代。繁殖迅速,每小时可增殖百倍。
病毒个体微小,形态多样,结构简单,仅含一种核酸(DNA或RNA)和一个蛋白质外壳。依其遗传物质的性质,可以分单链DNA、单链RNA、双链DNA和双链RNA病毒等四种类型。按照它们所感染的细胞类型可分为感染细菌、真菌及藻类的菌类病毒,以及感染动植物的动物病毒和植物病毒。
遗传学研究中应用最广泛的是感染细菌的病毒,又称为噬菌体(bacteriophage)。依其与宿主细胞的相互关系,可以分为烈性噬菌体(virulent phage)和温和噬菌体(temperate phage)两大类型。
1.世代周期短:
大肠杆菌(E. Coli)20分钟可繁殖一代。
2.便于管理和生化分析:
个体小,一般在1μm至几μm之间(1μm=1/1000mm),操作管理方便。
3.便于研究基因突变:
裸露的DNA分子(有的病毒为RNA分子),易受环境条件的影响而发生突变;单倍体生物,不存在显性掩盖隐性问题,突变均能表现出来。
三、细菌和病毒在遗传学研究的优越性
4.便于研究基因的作用:
影印培养,易检出营养缺陷型突变,有利于从生化角度来研究基因的作用。
5.便于基因重组研究:
细菌具有转化、转导和接合作用,利用这些特性可以进行精密的遗传学分析
6. 便于研究基因结构、功能及调控机制:
细菌和病毒的遗传物质简单,基因定位、结构分析及其分离易于进行,基因的表达调控也适于用生理生化的方法进行深入的研究。
7. 便于进行遗传操作:
染色体结构简单,没有组蛋白和其它蛋白的结合,更宜于进行遗传工程的操作。
四、细菌和病毒的研究方法
1.单细胞分离
菌液→稀释→涂布在固体培基→单个细胞分离→形成肉眼可见菌落。
细菌的研究方法:
2.影印法测定变异
采用影印法测定细菌是否发生变异以及发生何种变异。
细菌变异主要有形态特征变异和生理特性变异。
形态特征变异:菌落大小、形状、颜色
生理特性变异:
(1)营养缺陷型:丧失合成某种营养物质的能力,在基本培养基上不能生长。
原养型(野生型):能够在基本培养基上生长。
(2)抗性突变:抗药性和抗感染型。
细菌的影印培养方法(Lederberg, 1952)
病毒的研究方法:
1. 获得变异
亚硝酸、羟胺、乙基黄酸乙酯(EES)等化学药剂诱导发生变异。
常见变异:
寄主范围变异:野生型(h+):感染B菌株,产生半透明斑;突变型(h):感染B和B/2菌株,产生透明斑。
噬菌斑突变:野生型(r+):产生正常斑,小而边缘模糊;突变型(r):产生突变斑,大而边缘清晰。
所以:h+r感染B菌株产生半透明大斑;hr+感染B和B/2菌株,产生透明小斑。
2.杂交试验
双重感染分析子代噬菌体中重组型的频率。
1. 转化(transformation):裸露的非病毒的DNA导入细菌细胞的过程。
2. 转染(transfection):裸露的病毒(噬菌体)DNA导入细菌的过程。是一种特殊的转化形式。
3. 转导(transduction):以噬菌体为媒介将细菌的DNA从供体菌转移到受体菌的过程。
4. 接合(conjugation):细菌通过细胞之间的直接接触的方式传递遗传物质的过程。
一、细菌遗传物质的转移形式
第二节 细菌的遗传分析
通过接合作用,部分供体基因组DNA转移到受体菌中
通过接
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