抗凝剂EDTA二钠对家禽血液指标及基因组DNA的影响.pdfVIP

生 物 技 术 通 讯 378 LETTERS IN BIOTECHNOLOGY Vol.24 No.3 May, 2013 doi: 10.3969/j.issn. 1009-0002.2013.03.019 研究报告 抗凝剂EDTA-Na 对家禽血液指标及基因组DNA 的影响 2 a a b a 齐玉凯 ，孙钰 ，刘丽英 ，李显耀 山东农业大学 a. 动物科技学院；b. 生命科学学院；山东 泰安 271018 ［摘要］ 目的：分析不同浓度的抗凝剂EDTA-Na 对家禽血液指标及基因组DNA 抽提的影响。方法：采集鸡血，分别 2 加入0.6 （A 组）、0.9 （B 组）、1.2 （C 组）、1.5 （D 组）、1.8 （E 组）和2.1（F 组）mg/mL 的EDTA-Na ，立即检测白细胞总数 2 （WBC ）、淋巴细胞（LYM ）、中间细胞（MID ）、粒细胞（GRAN ）、红细胞总数（RBC ）、血红蛋白（HGB ）、血红蛋白含量 （MCH ）和血小板总数（PLT ），用SPSS 软件分析检测数据；用酚- 氯仿法提取添加不同量抗凝剂的血液基因组DNA ，并 进行PCR 扩增，基因组DNA 和PCR 产物用琼脂糖凝胶电泳检测。结果：A 组样品出现肉眼可见的凝块，B 组有2/7 样 品有凝集现象，C 、D 、E 和F 组均无凝集现象。A 组凝集现象严重无法进行血液指标测定，其余5 组样品中，对于RBC 和HGB 指标，C 组与B 组相比无显著性差异，与D 、E 、F 组差异极显著（P0.01 ）；对于PLT ，C 组与B 组相比无显著性差 异，与D 、E 、F 组差异显著（P0.05 ）；WBC 无显著变化。除A 组外，各组均能获得质量较好的基因组DNA ，并能扩增出 目的条带。结论：除A 组外，不同浓度的EDTA-Na 对基因组DNA 提取和PCR 扩增无影响。以EDTA-Na 作为禽血抗 2 2 凝剂时，建议用量应不低于1.2 mg/mL 。 ［关键词］ EDTA-Na ；抗凝剂；血液指标；基因组DNA ；PCR 扩增 2 ［中图分类号］ Q78; Q46 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009-0002 （2013 ）03-0378-04 Effects of EDTA-Na on Poultry Blood Indexes and Genomic DNA 2 a a b a * QI Yu-Kai , SUN Yu , LIU Li-Ying , LI Xian-Yao a. College of Animal Science and Technology